Anti-Human LAMP2 Monoklonaler Antikörper für intrazelluläre Durchflusszytometrie - P13473

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von LAMP2

• LAMP2 ist ein stark glykosyliertes lysosomales Membranglykoprotein mit einer Disulfidbindung und gehört zur LAMP-Familie.
• Es wirkt als direkter Inhibitor des lysosomalen Protonenkanals TMEM175, reguliert dadurch den pH-Wert des lysosomalen Lumens und ermöglicht eine optimale Hydrolaseaktivität. Zugehörige Referenzen: PMID:37390818
• Dient als kritischer Rezeptor für die chaperonvermittelte Autophagie (CMA), bindet an zytosolische chaperonerkannte Substrate (z. B. GAPDH, GPX4, NLRP3) und leitet sie zum lysosomalen Abbau. Zugehörige Referenzen: PMID:11082038 PMID:18644871 PMID:24880125 PMID:36586411
• Erforderlich für die Autophagosom-Lysosom-Fusion; Zellen ohne LAMP2 können STX17 nicht zu Autophagosomen rekrutieren, was den Abbau von autophaginischer Fracht verhindert. Zugehörige Referenzen: PMID:27628032
• Erleichtert die effiziente MHC-Klasse-II-Präsentation exogener Antigene durch die Ermöglichung des lysosomalen Proteinabbaus, obwohl es für die endogene Antigenpräsentation nicht erforderlich ist. Zugehörige Referenzen: PMID:15894275 PMID:20518820
• Unterstützt die FURIN-vermittelte Spaltung des Fusionsproteins F des Mumpsvirus durch Interaktion sowohl mit FURIN als auch mit dem unverarbeiteten viralen Protein.
• Durch alternatives Spleißen entstehen drei Isoformen (LAMP-2A, -2B, -2C) mit unterschiedlichen Gewebeverteilungen; LAMP-2A ist reichlich in Plazenta/Lunge/Leber vorhanden, während LAMP-2B breit exprimiert ist und LAMP-2C im Verdauungstrakt und Gehirn angereichert ist. Zugehörige Referenzen: PMID:26856698 PMID:7488019
• Lokalisiert hauptsächlich an Lysosom-, Endosom- und Autophagosommembranen und kann auch an der Zelloberfläche nachgewiesen werden.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der luminalen Domäne (Aminosäuren 29-375) von menschlichem LAMP2; der Antikörper erkennt wahrscheinlich ein extrazelluläres/lumines Epitop, das nach Permeabilisierung zugänglich ist.
• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie stellen Sie sicher, dass eine geeignete Fixierung und Permeabilisierung verwendet wird, die für das -Konjugat optimiert ist, um das Fluoreszenzsignal zu erhalten.
• LAMP2 wird in vielen Zelltypen exprimiert; berücksichtigen Sie die Einbeziehung geeigneter Positivkontrollen (z. B. HeLa, Jurkat) und Negativkontrollen, um die Spezifität in Ihrem experimentellen System zu bestätigen.
• Wenn Kreuzreaktivität zwischen Spezies erforderlich ist, validieren Sie den Antikörper in den relevanten nicht-menschlichen Proben, da die Kreuzreaktivität von der Erhaltung des Epitops abhängen kann.
• Wenn Sie die LAMP2-Detektion mit anderen lysosomalen Markern kombinieren, überprüfen Sie die Kompatibilität von Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokollen, um die Antigenität und Farbintegrität zu erhalten.

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