Anti-Human-Kappa-Leichtketten-Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, FC, ELISA - P01834

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der humanen Kappa-Leichtkette

• Die konstante Region des Immunglobulin-Kappa (IGKC) ist der konstante Teil der Leichtkette in Antikörpern. Sie paart sich mit einer variablen Domäne, um die vollständige Leichtkette zu bilden, und assoziiert mit einer schweren Kette, um ein Immunglobulin-Monomer zu bilden.
• Immunglobuline sind membrangebundene oder sekretierte Glykoproteine, die von B-Lymphozyten produziert werden. Membrangebundene Formen wirken als Rezeptoren, die nach Antigenbindung die klonale Expansion von B-Zellen und deren Differenzierung zu antikörpersekretierenden Plasmazellen auslösen. Sekretierte Antikörper vermitteln die Effektorphase der humoralen Immunität, was zur Antigeneliminierung führt. Verwandte Referenzen: PMID:20176268 PMID:22158414
• Die Antigenbindungsstelle wird durch die variablen Domänen einer schweren und einer leichten Kette gebildet. Diese variablen Domänen entstehen durch V-(D)-J-Rekombination und können somatischen Hypermutationen unterliegen, was eine Affinitätsreifung nach Antigenexposition ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:17576170 PMID:20176268
• Die konstante Kappa-Region ist sowohl in sekretierten Antikörpern als auch als Teil des membrangebundenen B-Zell-Rezeptors (BCR) vorhanden. Ihre subzellulären Lokalisationen umfassen den sekretierten extrazellulären Raum und die Plasmamembran.
• Strukturell enthält die konstante Region konservierte Cysteinreste, die eine intrakettige Disulfidbindung bilden, typisch für die Immunglobulin-Domänenfaltung. Das theoretische Molekulargewicht beträgt ~11,8 kDa (UniProt), was dem beobachteten Wert von 12 kDa in der SDS-PAGE entspricht.
• IGKC ist unter humanen Allotypen (Km-Allotypen) hochkonserviert und an der adaptiven Immunität beteiligt. Mutationen oder Ungleichgewichte in der Leichtkettenproduktion können zu Immunglobulinablagerungskrankheiten führen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die vollständige humane konstante Kappa-Region (Aminosäuren 1-107) und ermöglicht so eine breite Erkennung über alle Kappa-Leichtketten-Varianten und Allotypen hinweg.
• Für den Western Blot (WB) unter reduzierenden Bedingungen kann eine Bande bei ~12 kDa (freie Leichtkette) oder ~25 kDa (schwere + leichte Kette) beobachtet werden. Validieren Sie das spezifische Bandenmuster in Ihrem Probentyp.
• Bei der indirekten Immunfluoreszenz (IF-P) sollten geeignete Fixierungs- und Einbettungsprotokolle verwendet werden. Der Antikörper detektiert die konstante Region, sodass sowohl die Oberflächen- als auch die intrazelluläre Kappa-Leichtkette sichtbar gemacht werden kann.
• Für die Durchflusszytometrie (FC) sollten geeignete Isotypenkontrollen verwendet und der Antikörper für eine optimale Färbung humaner B-Zelllinien oder Proben, die humane Immunglobuline enthalten, titriert werden.
• Für ELISA bietet das Kaninchen-Monoklonal-Format eine konsistente Chargen-zu-Charge-Leistung; der Antikörper kann als Detektions- oder Capture-Komponente für Assays zur Quantifizierung humaner Antikörper dienen.

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