Kaninchen-polykolonaler Anti-Human-IL-5-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P05113

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Interleukin-5

• Interleukin-5 (IL-5) ist ein homodimeres Zytokin, auch bekannt als Eosinophilen-Differenzierungsfaktor (EDF) und T-Zell-Ersatzfaktor (TRF), das vom IL5-Gen (GeneID: 3567) kodiert wird.
• Spielt eine entscheidende Rolle für das Überleben, die Differenzierung und die Chemotaxis von Eosinophilen. Verwandte Referenzen: PMID:2653458 / PMID:9010276
• Fördert Wachstum, Differenzierung und Immunglobulinproduktion in aktivierten und ruhenden B-Zellen.
• Bindet an einen heterodimeren Rezeptor, der aus den Untereinheiten IL5RA und CSF2RB besteht. Verwandte Referenzen: PMID:1495999 / PMID:22528658
• Die Rezeptorbindung aktiviert Kinasen einschließlich LYN, SYK und JAK2 und leitet Signale über die RAS-MAPK- und JAK-STAT5-Signalwege weiter. Verwandte Referenz: PMID:7613138
• Sekretiertes Glykoprotein mit intramolekularen Disulfidbrücken; in peripheren mononukleären Blutzellen vorhanden.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die N-glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken, die für die biologische Aktivität essenziell sind.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen; die kanonische Form ist ein Vorläuferprotein aus 134 Aminosäuren mit einem 19 Aminosäuren langen Signalpeptid, aus dem ein reifes Protein von etwa 15 kDa entsteht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (AS 20–134) entspricht dem reifen IL-5-Protein; beim Western Blot wird unter reduzierenden Bedingungen eine Bande bei etwa 15 kDa erwartet; eine Bande bei etwa 30 kDa kann unter nicht reduzierenden Bedingungen das kovalente Homodimer darstellen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann eine Permeabilisierung erforderlich sein, um intrazelluläres oder sekretiertes IL-5 nachzuweisen; die Fixierungsbedingungen sollten optimiert werden.
• Beim ELISA sollten Vorversuche die optimalen Bedingungen für den Fang und den Nachweis unter Verwendung rekombinanter IL-5-Standards bestimmen.
• Aufgrund der vorhergesagten breiten Kreuzreaktivität kann dieser Antikörper IL-5 aus mehreren Spezies erkennen; validieren Sie ihn in der relevanten Zielspezies.
• Bei der empfohlenen Temperatur lagern und wiederholte Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, um die Aktivität zu erhalten.

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