Monoklonaler Anti-human-IL-4-Antikörper () für die intrazelluläre Durchflusszytometrie – P05112

Technische Kerndaten und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Interleukin-4 (IL-4)

• Interleukin-4 (IL-4), auch bekannt als B-Zell-stimulierender Faktor 1 (BSF-1), Binetrakin, lymphozytenstimulierender Faktor 1 und Pitrakinra, wird beim Menschen durch das IL4-Gen kodiert. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• IL-4 ist ein pleiotropes Zytokin, das hauptsächlich von Mastzellen, T-Zellen, Eosinophilen und Basophilen sezerniert wird und eine zentrale Rolle bei der Regulation der Antikörperproduktion, der Hämatopoese und von Entzündungsprozessen spielt. Zugehörige Referenzen: PMID:1993171 PMID:3016727
• IL-4 induziert die Expression von MHC-Klasse-II-Molekülen auf ruhenden B-Zellen und verstärkt sowohl die Sekretion als auch die Zelloberflächenexpression von IgE und IgG1. Zugehörige Referenz: PMID:1993171
• Es reguliert den niedrigaffinen IgE-Rezeptor (CD23) auf Lymphozyten und Monozyten hoch und trägt dadurch zu allergischen und antiparasitären Reaktionen bei. Zugehörige Referenz: PMID:2521231
• Die Signalübertragung erfolgt über zwei Rezeptorkomplexe: Typ 1 (IL4R/IL2RG) auf hämatopoetischen Zellen und Typ 2 (IL4R/IL13RA1) auf nicht hämatopoetischen Zellen. Dies führt zur Phosphorylierung von JAK3/JAK1 und zur Aktivierung von STAT6. Zugehörige Referenzen: PMID:10219247 PMID:11526337 PMID:18243101 PMID:7721895
• IL-4 reguliert die Expression von IL31RA in Makrophagen positiv und stimuliert über die mTORC1/RUFY4-Signalübertragung die Autophagie in dendritischen Zellen, wodurch die T-Zell-Homöostase beeinflusst wird.
• Im zentralen Nervensystem ist IL-4 an höheren kognitiven Funktionen wie Gedächtnis und Lernen beteiligt (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Das reife sezernierte Glykoprotein hat ein Molekulargewicht von etwa 17 kDa und enthält Disulfidbindungen, die für seine dreidimensionale Struktur essenziell sind.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Sequenz des reifen IL-4 (AS 25–153) und zielt auf das sezernierte Zytokin ab. Stellen Sie daher eine geeignete Permeabilisierung und Fixierung für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sicher.
• Titrieren Sie das -Konjugat auf eine optimale Konzentration für Ihren Zelltyp und Ihre Stimulationsbedingungen. Verwenden Sie Isotypkontrollen, um eine unspezifische Bindung zu beurteilen.
• Bei seltenen oder schwach exprimierenden Zellpopulationen sollte eine Vorstimulation mit PMA/Ionomycin oder eine antigenspezifische Aktivierung in Betracht gezogen werden. Verwenden Sie außerdem einen Viabilitätsfarbstoff, um tote Zellen auszuschließen.

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