Anti-humaner monoklonaler IL-17RB-Antikörper () für die Durchflusszytometrie – Q9NRM6

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von IL-17RB

• IL-17RB (Interleukin-17-Rezeptor B), auch bekannt als IL-17Rh1, CRL4 oder EVI27, ist ein Single-Pass-Transmembranrezeptor, der vom IL17RB-Gen auf dem menschlichen Chromosom 3 kodiert wird.
• Er fungiert als Rezeptor für die proinflammatorischen Zytokine IL-17B und IL-17E (IL-25) und vermittelt nachgeschaltete Signalwege, die das Wachstum und die Differenzierung hämatopoetischer Zellen regulieren können.
• Der Rezeptor enthält ein Signalpeptid, eine extrazelluläre Domäne, eine Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz; durch alternatives Spleißen entstehen neben der membrangebundenen Form auch sekretierte Isoformen.
• IL-17RB ist hauptsächlich an der Zellmembran lokalisiert, jedoch kann durch alternatives Spleißen auch eine lösliche, sezernierte Form entstehen.
• Die Gewebeexpression ist in mehreren endokrinen Geweben ausgeprägt, darunter fötale und adulte Leber, Niere, Pankreas, Hoden, Kolon, Gehirn und Dünndarm; in peripheren Blutleukozyten oder lymphatischen Organen wird IL-17RB jedoch nicht nachgewiesen.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehört die N-glykosidische Glykosylierung, wie in UniProt annotiert, was mit dem Durchlaufen des sekretorischen Weges übereinstimmt.
• Strukturell wurde der Rezeptor durch Röntgenkristallografie aufgeklärt, wobei für die Ligandenbindung und -spezifität entscheidende Merkmale sichtbar wurden.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Dieser -konjugierte Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein erzeugt, das die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 18–289) umfasst, eine für die Ligandenerkennung relevante Region. Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um mithilfe von IL-17RB-positiven Zellen (z. B. bestimmten endokrinen oder epithelialen Zelllinien) und einer Negativkontrolle eine optimale Färbekonzentration zu bestimmen.
• Da IL-17RB alternatives Spleißen und eine mögliche Sekretion zeigt, sollte sichergestellt werden, dass die membrangebundene Expression im Zielprobesystem bestätigt wird; eine Stimulation mit IL-17B/E oder proinflammatorische Bedingungen können die Oberflächenexpression erhöhen.
• Die Reaktivität des Antikörpers wurde für die Spezies Mensch validiert; aufgrund des Designs des Immunogens ist keine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies zu erwarten, Nutzer sollten dies jedoch für Anwendungen außerhalb des Menschen überprüfen.
• Bei mehrfarbigen Durchflusszytometrie-Panels ist zu beachten, dass bei etwa 650 nm angeregt wird und im fernroten Bereich emittiert; eine geeignete Kompensation sollte vorgenommen und bei Verwendung von Primärzellen eine Blockierung der Fc-Rezeptoren eingeschlossen werden.
• Die Proteingewichtsmarker von 31 kDa und 55 kDa entsprechen wahrscheinlich den nicht glykosylierten bzw. glykosylierten Formen; eine Bestätigung per Western Blot unter reduzierenden Bedingungen kann ähnliche Banden zeigen, wenn andere Nachweisformate verwendet werden.

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