Anti-Human Glypican 3 (GPC3) monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P51654

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Glypican-3-Funktion und Lokalisation

• Glypican-3 (GPC3) ist ein Zelloberflächen-Proteoglykan, das über einen GPI-Anker an die Plasmamembran gebunden ist (PubMed:14610063). Verwandte Referenzen: PMID:14610063
• Es reguliert den Hedgehog-Signalweg negativ, indem es mit PTC1 um Hedgehog-Proteine konkurriert und die Internalisierung/Degradation von SHH fördert.
• GPC3 reguliert den kanonischen Wnt-Signalweg positiv, indem es an Frizzled-Rezeptoren bindet und die Bindung von Wnt-Liganden verstärkt (PubMed:16227623, PubMed:24496449). Verwandte Referenzen: PMID:16227623 PMID:24496449
• Das Protein hemmt die DPP4-Dipeptidylpeptidase-Aktivität (PubMed:17549790) und bindet auch an CD81, um die HHEX-Transkriptionsrepression zu modulieren. Verwandte Referenzen: PMID:17549790
• Während der Embryogenese ist GPC3 für die Musterbildung der Gliedmaßen, die Skelettentwicklung und die renale Verzweigungsmorphogenese durch Modulation der BMP- und FGF-Signalgebung essentiell.
• Gewebeexpression: hoch in Plazenta (auf Proteinebene bestätigt), Lunge, Leber und Niere, was mit seinen Rollen in der Organogenese und Tumorbiologie korreliert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Spaltung, Heparansulfat-Anheftung und Phosphorylierung; alternatives Spleißen führt zu Isoformen, die bei 59–68 kDa beobachtet werden (kanonische Masse 65,6 kDa).
• Schlüsselwörter: Zellmembran, GPI-Anker, Glykoprotein, Heparansulfat, Proteoglykan, Krankheitsvariante.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Peptid (aa 481–580) in der Nähe der GPI-Anheftungsstelle; der Antikörper kann sowohl die Voll- als auch gespaltene Formen erkennen, dies sollte jedoch in Ihrem spezifischen Probensystem validiert werden.
• Als direkter -Konjugat ist dieser Antikörper gebrauchsfertig für die Durchflusszytometrie ohne Sekundärfärbung; eine Titration des Antikörpers für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis sollte in Betracht gezogen werden.
• Angesichts der Zelloberflächenlokalisation von GPC3 können Protokolle zur Färbung lebender Zellen eingesetzt werden; Fixierungs-/Permeabilisierungsbedingungen sollten empirisch getestet werden, wenn auch intrazelluläre Epitope untersucht werden sollen.
• Für Multiplex-Durchfluss-Panels sollte eine minimale spektrale Überlappung mit anderen Fluorophoren sichergestellt werden; wird bei 488 nm angeregt und emittiert bei ~520 nm.
• Es liegen keine Daten zur Kreuzreaktivität mit anderen Spezies vor; die Expression in Maus oder Ratte sollte bei Bedarf bestätigt werden.

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