Anti-Human Galectin-3 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (intrazellulär) - P17931

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Galectin-3

• Galectin-3, kodiert durch das LGALS3-Gen, ist ein multifunktionelles Protein, das auch als 35 kDa Lektin, kohlenhydratbindendes Protein 35 (CBP35), galaktosidbindendes Protein (GALBP), IgE-bindendes Protein, L-31, lamininbindendes Protein, Lektin L-29 und Mac-2-Antigen bekannt ist.
• Es fungiert als galaktosespezifisches Lektin, das IgE bindet und Wechselwirkungen mit Integrinen vermittelt, was zur Endothelzellmigration und Differenzierung von säulenförmigen Epithelzellen während der Embryogenese beiträgt.
• Im Zellkern wirkt Galectin-3 als Prä-mRNA-Spleißfaktor, während es im Zytoplasma an der Erkennung geschädigter Endomembranen beteiligt ist und die Autophagie koordiniert, indem es zusammen mit TRIM16 ATG16L1 und BECN1 rekrutiert.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei akuten Entzündungsreaktionen, einschließlich der Neutrophilenaktivierung und -adhäsion, der Chemoattraktion von Monozyten/Makrophagen, der Opsonisierung apoptotischer Neutrophilen und der Mastzellaktivierung.
• Das Protein pendelt zwischen Zytoplasma, Zellkern und extrazellulärem Raum und wird über einen nicht-klassischen Weg sezerniert, obwohl es kein Signalpeptid besitzt.
• Galectin-3 unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung und enthält Disulfidbindungen, die seine Lektinaktivität und Stabilität regulieren können.
• Es wird überwiegend im Kolonepithel, aktivierten Makrophagen und fetalen Membranen exprimiert, was seine Bedeutung für Immunabwehr und Gewebsumbau unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein gerichtet, das die volle Länge von humanem Galectin-3 (Aa 1–250) abdeckt; er erkennt erwartungsgemäß sowohl die zytoplasmatische als auch die nukleäre Fraktion des Proteins.
• Optimieren Sie für die intrazelluläre Durchflusszytometrie (FC intrazellulär) die Permeabilisierungs- und Fixierungsprotokolle, um dem Antikörper den Zugang zu Galectin-3 in verschiedenen subzellulären Kompartimenten zu ermöglichen.
• Da Galectin-3 auch sezerniert werden kann, sollten Sie bei Interesse an Oberflächen- oder freigesetztem Protein Sekretionsinhibitoren in Betracht ziehen oder extrazelluläre Fraktionen analysieren; geeignete Kontrollen sollten enthalten sein.
• Validieren Sie die Färbespezifität mit Galectin-3-Knockout- oder Knockdown-Zelllinien oder inkubieren Sie den Antikörper vorab mit dem Immunogen, um eine Signalreduktion zu bestätigen.
• Antikörperkonzentration und Inkubationszeiten müssen für Ihr spezifisches experimentelles System möglicherweise titriert werden; testen Sie einen Bereich von Verdünnungen, um das optimale Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen.

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