Anti-Human E-Cadherin/CD324 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P12830

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von E-Cadherin

• Cadherin-1 (E-Cadherin), codiert durch das CDH1-Gen, ist ein kalziumabhängiges Zelladhäsionsprotein, das homophile Zell-Zell-Interaktionen vermittelt und zur Sortierung heterogener Zelltypen sowie zur Aufrechterhaltung der epithelialen Integrität beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:11976333
• Es organisiert radiale Aktinfaserstrukturen und moduliertiert zelluläre Antworten auf kontraktile Kräfte durch seine Interaktion mit AMOTL2, wodurch es die epitheliale Mobilität und Proliferation beeinflusst.
• E-Cadherin erleichtert die frühen Stadien der Desmosomen-Zusammenlagerung durch Rekrutierung von DSG2 und DSP an Zell-Zell-Kontakte und koppelt Adhärenskontakte mit desmosomalen Komplexen. Verwandte Referenzen: PMID:29999492
• Das Protein ist vorwiegend an der Zellmembran lokalisiert, insbesondere an Adhärenskontakten und Desmosomen, kann aber auch im Zytoplasma, in Endosomen und im trans-Golgi-Netzwerk gefunden werden. Eine sezernierte Form wurde ebenfalls identifiziert.
• Alternatives Spleißen, proteolytische Spaltung und posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung und Ubiquitinierung generieren multiple Isoformen und funktionelle Fragmente mit unterschiedlichen Rollen in der Signalübertragung und im Abbau.
• E-Cadherin wirkt als potenter Invasions-Suppressor in epithelialen Zellen und dient als Ligand für Integrin αE/β7 auf intraepithelialen Lymphozyten.
• Im Amyloid-Stoffwechsel fördert das C-terminale Fragment (E-Cad/CTF2) den nicht-amyloidogenen Abbau von APP und reduziert die Produktion neurotoxischer Aβ-Peptide.
• Pathologisch wird E-Cadherin als Rezeptor für Listeria monocytogenes Internalin A entführt, was die Aufnahme von Bakterien in Wirtszellen fördert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 155–707) und gewährleistet die Erkennung von oberflächenexponierten Epitopen, die für Anwendungen der Durchflusszytometrie an lebenden Zellen geeignet sind.
• Für die Durchflusszytometrie (FC) titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Färbekonzentration in Ihrem spezifischen Zellsystem zu bestimmen. Fügen Sie geeignete Isotyp-Kontrollen ein und bestätigen Sie die Spezifität unter Verwendung von E-Cadherin-Knockout- oder Knockdown-Modellen, falls verfügbar.
• Berücksichtigen Sie, dass E-Cadherin leicht gespalten oder abgestoßen wird; die Oberflächenexpression kann durch Kulturbedingungen, Zelldichte und Fixierungs/Permeabilisierungs-Protokolle beeinflusst werden. Validieren Sie die Detektionsparameter unter für Ihr experimentelles Modell relevanten Bedingungen.
• Da E-Cadherin kalziumabhängige Homodimere bildet, stellen Sie sicher, dass die Färbepuffer physiologische Kalziumkonzentrationen enthalten, um die native Konformation und die Epitop-Zugänglichkeit zu bewahren.

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