Anti-Human Cytokeratin 18 Monoklonaler Antikörper für intrazelluläre Durchflusszytometrie - P05783

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Cytokeratin 18

• Keratin 18 (K18/CK-18/CYK18) ist ein Typ-I-Intermediärfilament-Protein, das vom KRT18-Gen kodiert wird, und bildet obligate Heteropolymere mit dem Typ-II-Keratin KRT8, um mechanische Stabilität und Widerstandsfähigkeit für einfache Epithelzellen bereitzustellen. Verwandte Referenzen: PMID:15529338, PMID:26823019
• KRT8/KRT18-Filamente vermitteln die ARHGEF40-induzierte Bildung und Verstärkung von Aktin-Stressfasern unter Zugkraft und sind Teil einer positiven Rückkopplungsschleife downstream der ROCK-Kinase-Aktivierung als Reaktion auf mechanischen Stress. Verwandte Referenzen: PMID:26823019
• Die Phosphorylierung von K18 reguliert die Reorganisation der Filamente und ist entscheidend für den mitotischen Fortschritt, zelluläre Stressreaktionen und die Dynamik der Intermediärfilamente. Verwandte Referenzen: PMID:7523419, PMID:8522591, PMID:9298992
• K18 beteiligt sich an der Lieferung von mutiertem CFTR an die Plasmamembran, beeinflusst die Pathologie der zystischen Fibrose und trägt zum interleukin-6 (IL-6)-vermittelten Schutz der epithelialen Barriere bei. Verwandte Referenzen: PMID:15529338, PMID:16424149, PMID:17213200
• Das Protein lokalisiert sich in der Kernmatrix, im Zytoplasma (perinukleäre Region) und im Nukleolus, was seine dynamische Rolle in der zellulären Architektur widerspiegelt.
• Es wird in Kolon, Plazenta und Leber exprimiert und schwach im Exozervix; die Expression ist in Lymphknoten von Brustkrebskarzinomen hochreguliert, was auf eine Rolle beim Krebsfortschritt hindeutet.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Methylierung, Ubiquitinierung und Phosphorylierung, die seine Funktion und Wechselwirkungen modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sorgen Sie für eine ausreichende Permeabilisierung (z. B. unter Verwendung von Saponin- oder Triton X‑100-basierten Puffern), um dem Antikörper den Zugang zu zytoplasmatischen Intermediärfilamenten zu ermöglichen.
• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 241–430 von humanem K18; daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich ein lineares Epitop innerhalb dieses Bereichs. Validieren Sie die Reaktivität mit Volllängen- und potenziellen Kaspase-gespaltenen Fragmenten in Ihrem experimentellen System.
• Als kaninchenmonoklonaler Antikörper bietet er eine hohe Spezifität und Charge-zu-Charge-Konsistenz. Titrieren Sie den Antikörper von 0,1–1 µg pro einer Million Zellen, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen.
• Dieses Produkt ist vor-konjugiert mit (äquivalent zu Alexa Fluor® 488). Schützen Sie es vor Licht und verwenden Sie einen 488-nm-Laser mit einem 530/30-Bandpassfilter für die Detektion.

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