Anti-Human CD70 (CD27L) monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P32970

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD70-Funktion und -Lokalisation

• CD70, auch bekannt als CD27-Ligand (CD27L) oder TNFSF7, ist ein Typ-II-Transmembranprotein und Mitglied der Tumornekrosefaktor (TNF)-Ligandenfamilie; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• An der Plasmamembran von B-Zellen exprimiert, dient CD70 als Ligand für CD27, das spezifisch auf der Oberfläche von T-Zellen exprimiert wird. Verwandte Referenzen: PMID:28011863, PMID:28011864, PMID:8387892
• Die CD70-CD27-Interaktion löst die antigenspezifische T-Zellaktivierung und klonale Expansion aus und ermöglicht so eine kritische Immunüberwachung von B-Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:28011863, PMID:28011864
• CD70 ist ein Einzelpass-Membranprotein mit einer extrazellulären C-terminalen TNF-Homologiedomäne, die durch Disulfidbindungen und Glykosylierung stabilisiert wird.
• Subzellulär lokalisiert CD70 an der Zellmembran, was mit seiner Rolle in der interzellulären Kommunikation übereinstimmt.
• Lösliche Formen von CD70 können durch alternatives Spleißen von der Zelloberfläche abgespalten werden und möglicherweise Immunantworten modulieren.
• Der CD27/CD70-Signalweg ist an der Lymphozyten-Kostimulation, antiviralen Immunität und Tumorimmunität beteiligt, was CD70 zu einem Ziel für die Krebsimmuntherapie und die Erforschung von Autoimmunerkrankungen macht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 39-193) von humanem CD70; erwägen Sie die Verwendung eines Proteaseinhibitor-Cocktails, um die Abschuppung während der Zellvorbereitung für die Durchflusszytometrie zu verhindern.
• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Assay-Bedingungen zu bestimmen, und schließen Sie eine geeignete Isotypenkontrolle ein.
• Da CD70 auf aktivierten Immunzellen exprimiert wird, kann die Stimulation primärer Lymphozyten oder die Verwendung relevanter Zelllinien die Detektion verbessern; validieren Sie die Expression in Ihrem Proben-System vor der quantitativen Analyse.
• Beachten Sie, dass CD70 von der Zelloberfläche abgespalten werden kann; kurze Färbezeiten und eiskalte Puffer können die Oberflächenmarkierung erhalten helfen.

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