Anti-Human CD59 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (FC) - P13987

Biologischer Hintergrund: CD59-Funktion und -Lokalisierung

• CD59, auch bekannt als Protectin, MAC-inhibitorisches Protein (MAC-IP) und 20 kDa homologer Restriktionsfaktor (HRF20), ist ein GPI-verankertes Glykoprotein, das als kritischer Komplementregulator dient.
• Es fungiert als potenter Inhibitor des Membranangriffskomplexes (MAC), indem es an die C8- und C9-Komponenten bindet und die Bildung des zytolytischen Pores verhindert. Verwandte Referenzen: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• CD59 ist weitgehend auf menschlichen Zellen exprimiert, über einen Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-Rest an die Plasmamembran verankert und schützt Wirtszellen vor autologer komplementvermittelter Lyse.
• Eine lösliche Form, die im Urin gefunden wird, behält die Komplementbindung bei, zeigt aber im Vergleich zur membrangebundenen Isoform eine stark reduzierte MAC-inhibitorische Aktivität.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Disulfidbrückenbildung, Glykierung und N-verknüpfter Glykosylierung; Mutationen sind mit erblicher hämolytischer Anämie verbunden.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Transkriptvarianten, und das Protein wurde durch direkte Proteinsequenzierung und großangelegte Proteomik identifiziert.
• Subzellulär lokalisiert CD59 an der Zellmembran und wird auch sezerniert, was zur Immun evasion und Signalgebung über die Komplementhemmung hinaus beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 26–101 von humanem CD59, was der reifen extrazellulären Domäne entspricht; es wird erwartet, dass der Antikörper natives, membrangebundenes CD59 erkennt. Erwägen Sie die Verwendung eines passenden Isotyp-Kontrollantikörpers für Durchflusszytometrie-Experimente.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den -konjugierten Antikörper an menschlichen peripheren Blutmononukleären Zellen (PBMCs) oder CD59-exprimierenden Zelllinien, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen.
• CD59 ist GPI-verankert; vermeiden Sie Behandlungen, die GPI-verankerte Proteine freisetzen können (z. B. Phospholipase C), es sei denn, Sie bewerten spezifisch die Ankerabhängigkeit. Validieren Sie im relevanten Probensystem.
• Die Kreuzreaktivität wird nur für den Menschen angegeben; wenn Sie mit nicht-menschlichen Modellen arbeiten, validieren Sie vor der Verwendung die Spezifität und Reaktivität.

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