Anti-humaner monoklonaler CD244/2B4-Antikörper für die Durchflusszytometrie – Q9BZW8

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD244/2B4

• CD244 (auch bekannt als 2B4, SLAMF4, NAIL, NKR2B4) ist ein Mitglied der Familie der Signaling Lymphocytic Activation Molecules (SLAM), einer Gruppe von Rezeptoren, die Immunzellfunktionen durch homo- und heterotype Interaktionen modulieren.
• Wirkt nach Bindung an seinen Liganden CD48 als aktivierender Rezeptor natürlicher Killerzellen (NK-Zellen) und stimuliert die Zytotoxizität von NK-Zellen, die Produktion von IFN-Gamma und die Granulaexozytose. Zugehörige Referenzen: PMID:10359122, PMID:11714776, PMID:8376943
• Die Funktion des Rezeptors wird durch die zytoplasmatischen Adapter SH2D1A/SAP und SH2D1B/EAT-2 kontrolliert; die Assoziation mit SH2D1A und FYN führt zu einer aktivierenden Signalübertragung unter Beteiligung von VAV1, während INPP5D, PTPN6 und PTPN11 in Abwesenheit von SH2D1A die Signalabschwächung vermitteln. Zugehörige Referenzen: PMID:15713798, PMID:10934222
• CD244 wirkt als Kostimulator bei der Aktivierung von NK-Zellen, indem es Signale anderer Rezeptoren wie NCR3 und NCR1 verstärkt, und übt während der Proliferation auch eine kostimulatorähnliche Funktion für benachbarte CD8+-T-Zellen aus. Zugehörige Referenzen: PMID:10741393
• In frühen Stadien der NK-Zell-Differenzierung kann CD244 als inhibitorischer Rezeptor fungieren und möglicherweise die Selbsttoleranz der sich entwickelnden NK-Zellen gewährleisten. Zugehörige Referenzen: PMID:11917118
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert CD244 an der Zellmembran und ist in Membran-Rafts angereichert, was mit seiner Rolle bei der Signalübertragung an der Immunsynapse übereinstimmt.
• CD244 wird breit in Immungeweben (Milz, peripheren Blutleukozyten, Lunge, Leber, Hoden, Dünndarm) sowie auf allen NK-Zellen, Monozyten, Basophilen, TCR-Gamma/Delta+-T-Zellen und einer Untergruppe von CD8+-T-Zellen exprimiert.
• Mehrere Proteinisoformen (30–41 kDa) entstehen durch alternatives Spleißen; das Protein ist ein Glykoprotein und Phosphoprotein und enthält Disulfidbrücken sowie Immunglobulindomänen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (AS 22–221), was darauf hindeutet, dass der Antikörper den nativen Oberflächenrezeptor erkennt und sich daher für die Färbung lebender Zellen in der Durchflusszytometrie eignet.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper empirisch titriert werden (z. B. 0,1–1 µg pro 10^6 Zellen testen), um die optimale Konzentration für Ihren Zelltyp und Ihre Versuchsbedingungen zu bestimmen.
• Die CD244-Expressionslevel variieren zwischen den Zelluntergruppen; verwenden Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. NK-Zellen) und Negativkontrollen und erwägen Sie eine Blockierung von Fc-Rezeptoren, um den Hintergrund zu minimieren.
• Stellen Sie sicher, dass das -Konjugat mit der Laser- und Filterkonfiguration Ihres Geräts kompatibel ist (Anregung ~590 nm, Emission ~617 nm).

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