Monoklonaler Anti-human-CD15/SSEA-1-Antikörper für die Durchflusszytometrie – P22083

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD15/SSEA-1 (FUT4)

• Das von FUT4 (Gen-ID 2526) kodierte Protein ist die Alpha-(1,3)-Fucosyltransferase 4, eine Glykosyltransferase, die für den abschließenden Fucosylierungsschritt verantwortlich ist, durch den das Lewis-X-Kohlenhydratantigen (CD15/SSEA-1) auf N- und O-verknüpften Glykoproteinen entsteht. Zugehörige Referenzen: PMID:1702034 PMID:1716630 PMID:29593094

• FUT4 überträgt Fucose von GDP-β-L-Fucose auf das distale N-Acetylglucosamin von Typ-2-Laktosaminketten (Galβ1-4GlcNAc), am effizientesten auf nicht sialylierten Akzeptoren, und erzeugt dadurch das Lewis-X-Epitop. Zugehörige Referenzen: PMID:1716630 PMID:29593094

• In bestimmten Zelltypen kann FUT4 außerdem einen internen GlcNAc-Rest fucosylieren und dadurch das VIM-2-Antigen erzeugen, einen Liganden für E-Selektin (SELE). Zugehörige Referenzen: PMID:11278338 PMID:1716630

• Gemeinsam mit FUT7 trägt FUT4 zur Biosynthese von Selektinliganden (Sialyl-Lewis-X und 6-Sulfo-Sialyl-Lewis-X) bei, die das Rollen von Leukozyten und deren Einwanderung zu Entzündungsherden vermitteln.

• FUT4 ist ein Transmembranprotein, das in der Membran des Golgi-Apparats lokalisiert ist, wo es während des Transports durch den sekretorischen Weg mit seinen Glykoproteinsubstraten in Kontakt kommt.

• Eine Expression wurde in mesenchymalen Stammzellen aus dem Knochenmark, unreifen Promyelozyten aus Nabelschnurblut sowie in myeloiden und lymphoiden Populationen des peripheren Blutes nachgewiesen.

• Das Protein enthält alternative Initiationsstellen und ist selbst N-glykosyliert; es gehört zur Familie der Glykosyltransferase 10 und enthält eine Signalankersequenz.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, abgeleitet von humanem CD15/SSEA-1; berücksichtigen Sie, dass der Antikörper möglicherweise ein lineares Epitop erkennt, das die native Kohlenhydratstruktur oder ein Peptidrückgrat des Trägerglykoproteins nachahmt.
• Für die Durchflusszytometrie sollten geeignete Isotypkontrollen eingesetzt und die Reaktivität an einer CD15-positiven Zelllinie (z. B. HL-60) sowie einer CD15-negativen Zelllinie (z. B. K562) überprüft werden.
• Für Anwendungen zur Immunphänotypisierung sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Konzentration für Ihre spezifische Zellpopulation und Ihr Färbeprotokoll zu bestimmen.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht des Zielenzyms beträgt ca. 59 kDa; beachten Sie bei einem gegebenenfalls durchgeführten Western Blot, dass der Antikörper entweder das glykosylierte FUT4-Protein oder dessen CD15-tragende Glykoproteinprodukte erkennen kann.

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