Anti-Human CD146 monoklonaler Antikörper () für Durchflusszytometrie – P43121

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD146

• CD146, auch bekannt als MUC18, MCAM, HEMCAM, METCAM oder MelCAM, ist ein zelloberflächiges Glykoprotein der Immunglobulin-Superfamilie, das vom MCAM-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als kalziumunabhängiges Zelladhäsionsmolekül und spielt eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung des Zusammenhalts der Endothelzellschicht an den interzellulären Verbindungen im vaskulären Gewebe.
• Die Expression von CD146 in Melanomzellen ist mit einer verstärkten Interaktion mit Gefäßen verbunden, was die hämatogene Tumorausbreitung und Metastasierung potenziell begünstigt.
• Es wirkt zudem als Oberflächenrezeptor, der intrazelluläre Signale auslöst, darunter die Tyrosinphosphorylierung von FYN und PTK2/FAK1 sowie einen transienten Anstieg der intrazellulären Kalziumkonzentration.
• Während der embryonalen Entwicklung erscheint CD146 auf der Oberfläche von Neuralleistenzellen, was auf eine Adhäsionsrolle bei der Zellwanderung hindeutet.
• In normalen adulten Geweben ist die Expression von CD146 weitgehend auf vaskuläre glatte Muskelzellen und Endothelzellen beschränkt; seine Hochregulation korreliert stark mit Tumorprogression und Metastasierung bei malignem Melanom.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Glykosylierung und Phosphorylierung; das Protein enthält eine Signalsequenz, eine Transmembranhelix und mehrere immunglobulinähnliche Domänen mit Disulfidbindungen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 24–559 ab, was der extrazellulären Domäne von CD146 entspricht. Daher ist dieser Antikörper geeignet, oberflächenexprimiertes CD146 in nicht permeabilisierten Zellen mittels Durchflusszytometrie nachzuweisen.
• Optimale Färbebedingungen (Antikörperkonzentration, Inkubationszeit und Temperatur) sollten vom Endanwender im entsprechenden Zellsystem (z. B. humane Endothel- oder Melanomzelllinien) titriert werden.
• Schützen Sie das Konjugat während der Färbung und Lagerung vor Licht, um das -Fluorochrom zu erhalten.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und eine Lebend-Tot-Unterscheidung, um eine spezifische Detektion sicherzustellen.
• Der Antikörper kann auch in anderen Immunoassays eingesetzt werden, die native extrazelluläre Epitope nachweisen, diese Anwendungen erfordern jedoch eine unabhängige Validierung.

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