Anti-humaner CD123-(IL3Rα)-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P26951

Technische Kerndaten und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD123

• Die Alpha-Untereinheit des Interleukin-3-Rezeptors (IL3RA), auch als CD123 bekannt, ist ein Typ-I-Membranglykoprotein und die ligandbindende Alpha-Kette des Rezeptors für Interleukin-3.
• Nach der Bindung von IL-3 bildet sie durch Heterodimerisierung mit der gemeinsamen Beta-Kette (IL3RB/CD131) einen Rezeptor mit hoher Affinität und initiiert intrazelluläre Signalkaskaden.
• Die Aktivierung des Rezeptorkomplexes führt zur Phosphorylierung und Aktivierung von JAK2 und PI3K, die wiederum STAT5-gesteuerte Transkriptionsprogramme vermitteln, welche für die Zellproliferation und -differenzierung entscheidend sind (durch Ähnlichkeit).
• CD123 wird überwiegend auf der Oberfläche hämatopoetischer Vorläuferzellen, Monozyten und B-Lymphozyten exprimiert und spielt eine Schlüsselrolle bei der Hämatopoese. Verwandte Referenzen: PMID:10527461
• Die subzelluläre Lokalisation befindet sich hauptsächlich in der Zellmembran, was mit seiner Funktion als Zytokinrezeptor übereinstimmt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören vorhergesagte N-Glykosylierungsstellen und Disulfidbrücken, die für die korrekte Faltung und Stabilität unerlässlich sind; außerdem kann eine Ubiquitinierung stattfinden.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen. Die dreidimensionale Struktur der extrazellulären Domäne wurde aufgeklärt und liefert Einblicke in die Ligand-Rezeptor-Wechselwirkungen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die gesamte extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 1–378), wodurch dieser Antikörper optimal für die Erkennung von nativem CD123 auf lebenden Zellen geeignet ist.
• Für Anwendungen in der Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen. Geeignete Isotypkontrollen sollten eingeschlossen werden, um eine spezifische Bindung zu unterscheiden.
• Da CD123 in verschiedenen Zelltypen in unterschiedlicher Stärke exprimiert wird, sollte der Antikörper in der Zielzellpopulation unter Bedingungen validiert werden, die Oberflächenepitope erhalten (z. B. Fixierung vermeiden, wenn dadurch das Epitop maskiert wird).
• Erwägen Sie einen Blockierungsschritt mit rekombinantem IL-3, um die Spezifität der Rezeptorbindung zu bestätigen, insbesondere bei der Analyse von Zellen mit geringer Antigendichte.

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