Anti-Human CD117/c-Kit Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P10721

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase des Typs III, die als Zelloberflächenrezeptor für den Stammzellfaktor (KITLG/SCF) fungiert. Er wird vom KIT-Protoonkogen codiert und ist auch bekannt als Mast-/Stammzell-Wachstumsfaktorrezeptor, Piebald-Trait-Protein (PBT) und p145 c-kit.
• Nach Ligandenbindung aktiviert KIT mehrere nachgeschaltete Signalkaskaden einschließlich des PI3K/AKT-, RAS/RAF/MAPK- und STAT-Signalwegs und reguliert so Zellüberleben, Proliferation und Differenzierung in hämatopoetischen, Keimzell- und Melanozytenlinien.
• Das Protein verfügt über einen extrazellulären Bereich mit fünf immunoglobulinähnlichen Domänen, eine einzelne Transmembranhelix und eine intrazelluläre Tyrosinkinasedomäne. Dokumentierte alternatives Spleißen erzeugt unterschiedliche Isoformen.
• KIT ist entscheidend für die Entwicklung und Funktion von Mastzellen; es ist auch essenziell für die Gametogenese, wobei eine Expression in testikulären Spermatogonien, interstitiellen Leydig-Zellen und ejakulierten Spermatozoen nachgewiesen wurde. Verwandte Referenzen: PMID:20601678
• Subzellulär befindet sich KIT hauptsächlich an der Zellmembran, kann aber nach Aktivierung oder Internalisierung auch im Zytoplasma nachgewiesen werden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität und Signalgebung regulieren.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 109-110 kDa und wird zu den Tyrosin-Protein-Kinase-Rezeptoren mit ATP-bindenden und metallbindenden Eigenschaften gezählt.
• Klinisch sind Mutationen in KIT mit Piebaldismus, Mastozytose, gastrointestinalen Stromatumoren und anderen Malignitäten assoziiert, wodurch es ein diagnostisches und therapeutisches Ziel darstellt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen erstreckt sich über die Aminosäuren 26-520 und deckt die gesamte extrazelluläre Domäne des menschlichen CD117/c-Kit ab. Dieses Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass der native, an der Zelloberfläche lokalisierte Rezeptor auf lebenden Zellen erkannt wird, wodurch der Antikörper für durchflusszytometrische Anwendungen geeignet ist.
• Bei der Verwendung dieses -konjugierten Antikörpers in der Durchflusszytometrie sollten Sie eine Titration des Antikörpers durchführen, um die optimale Färbekonzentration für Ihre spezifische Zellart und experimentellen Bedingungen zu bestimmen.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Vitalitätsfarbstoffe, um eine genaue Populationsgating zu gewährleisten – insbesondere bei der Analyse seltener hämatopoetischer Stammzellen oder Mastzellen.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in Ihrer Probenmatrix (z. B. peripheres Blut, Knochenmark, Zelllinien) und verwenden Sie bekannte Positiv- und Negativkontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.

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