Anti-Human B7-H2/CD275 (ICOSL) Monoklonaler Antikörper () für die Durchflusszytometrie - O75144

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von B7-H2/CD275 (ICOSL)

• ICOS-Ligand (ICOSL, auch bekannt als B7-H2, CD275, B7RP-1, GL50) ist ein Mitglied der B7-Familie immunregulatorischer Proteine, das kostimulatorische Signale bereitstellt, die für die T-Zell-Aktivierung und Effektorfunktionen essenziell sind.
• Die Interaktion zwischen ICOSL und seinem Rezeptor ICOS auf T-Zellen fördert die T-Zell-Proliferation und die Zytokinsekretion, wie Interleukin-4 (IL-4) und Interferon-gamma (IFN-γ). Verwandte Referenzen: PMID:11007762 PMID:11023515 PMID:30498080
• ICOSL induziert auch die B-Zell-Proliferation und -Differenzierung zu Plasmazellen, was seine Rolle in der humoralen Immunität unterstreicht.
• In Endothelzellen ist ICOSL für die ordnungsgemäße Neutrophilen-Transmigration als Reaktion auf Chemoattraktanten wie CXCL8/IL8 oder fMLP erforderlich, was adaptive und angeborene Immunität verbindet. Verwandte Referenzen: PMID:30498080
• Das Protein wird auf der Zellmembran exprimiert und ist weit verbreitet in Geweben wie Lymphknoten, Leukozyten, Milz sowie auf aktivierten Monozyten und dendritischen Zellen sowie peripheren Blut-B-Zellen und Monozyten.
• ICOSLG unterliegt alternativem Spleißen, was Isoformen erzeugt, und enthält Immunglobulin-ähnliche Domänen, ein Signalpeptid und eine Transmembranhelix. Es handelt sich um ein Glykoprotein mit Disulfidbindungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Durchflusszytometrie: Verwenden Sie den direkt konjugierten -Antikörper zur Oberflächenfärbung lebender Zellen ohne Permeabilisierung, da das Immunogen auf die extrazelluläre Domäne (aa 19-256) abzielt.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Versuchsaufbau zu bestimmen; ein typischer Startbereich liegt bei 0,1–1 µg pro 10^6 Zellen.
• Fügen Sie eine geeignete Isotypenkontrolle (Kaninchen-IgG ) hinzu, um unspezifische Bindung zu beurteilen.
• Validieren Sie die Reaktivität in Ihrer Zielzellpopulation, die B7-H2/CD275 exprimiert (z.B. aktivierte Monozyten, dendritische Zellen oder B-Zell-Linien), und bestätigen Sie die Spezifität nach Möglichkeit mit ICOSL-Knockout- oder Blockierungskontrollen.

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