Anti-HSP70/HSPA1A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P0DMV8/P0DMV9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HSP70/HSPA1A Funktion und Lokalisierung

• HSPA1A (Heat Shock 70 kDa Protein 1A) ist ein kanonisches Mitglied der HSP70-Familie von Molekularchaperonen, das für die Proteinhomöostase sowohl unter normalen als auch unter Stressbedingungen unerlässlich ist (UniProt).
• Fungiert als ATP-abhängiger Chaperon: Es zyklisiert zwischen einem ATP-gebundenen (niedrige Substrataffinität) und einem ADP-gebundenen (hohe Substrataffinität) Zustand, was die Substratbindung und -freisetzung erleichtert, wobei J-Domain-Cochaperone (HSP40s) die ATPase-Aktivität stimulieren und Nukleotid-Austauschfaktoren (BAG-Familie) die ADP-Freisetzung fördern. Verwandte Referenzen: PMID:24012426 PMID:24318877 PMID:26865365
• Steuert die Protein-Triage: Sein Acetylierungsstatus bestimmt, ob es die Refaltung über HOPX oder den ubiquitin-vermittelten Abbau über STUB1/CHIP fördert, wodurch die Qualitätskontrolle des Proteoms ausbalanciert wird. Verwandte Referenzen: PMID:27708256
• Lokalisiert sich primär im Zytoplasma und Kern, assoziiert aber auch während der Mitose mit dem Zentrosom, wo es für die Integrität der Spindelpole und die bipolare Spindelassembly erforderlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:27137183
• Reguliert wichtige Signalwege: Verstärkt die STUB1-vermittelte Ubiquitinierung und den Abbau von SMAD3 (Hemmung der TGF-β-Signalisierung) und FOXP3 (in regulatorischen T-Zellen während der Entzündung). Verwandte Referenzen: PMID:24613385 PMID:23973223
• Beteiligt sich an der Beseitigung fehlgefalteter Transkriptionsfaktoren, wie z. B. PRDM1/Blimp‑1, indem sie im Zytoplasma zurückgehalten und für den proteasomalen Abbau gezielt werden. Verwandte Referenzen: PMID:28842558
• Reguliert die HSF1-Transkriptionsaktivität während der Erholungsphase der Hitzeschockantwort negativ und trägt zur Dämpfung der Stressantwort bei. Verwandte Referenzen: PMID:9499401
• Kann extrazellulär sezerniert werden und dient in bestimmten pathologischen Kontexten als Wirtszellrezeptor für den Eintritt von Rotavirus A. (SWISS-PROT)

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer Sequenz innerhalb der Aminosäuren 500-600 von humanem HSPA1A, einem Bereich, der zwischen Mensch, Maus und Ratte hochkonserviert ist; daher ist eine breite Kreuzreaktivität zu erwarten, aber Benutzer sollten die Leistung in ihrem spezifischen Probensystem validieren.
• Für Western Blot wird eine Bande bei ~70 kDa beobachtet; Fügen Sie immer geeignete positive (z. B. Hitzeschock-HeLa-Lysat) und negative Kontrollen ein und erwägen Sie die Verwendung eines Housekeeping-Proteins zur Normalisierung.
• Für Immunfluoreszenz und Immunhistochemie optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, da HSP70 sowohl in zytoplasmatischen als auch in nukleären Kompartimenten vorhanden sein kann; eine Antigen-Retrieval kann für formalinfixierte, in Paraffin eingebettete Schnitte erforderlich sein.
• Bei Verwendung in ELISA stellen Sie sicher, dass der Beschichtungspuffer und die Blockierungsbedingungen mit polyklonalen Antikörpern kompatibel sind, um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• Dieser Antikörper wurde für die Verwendung in Western Blot, Immunfluoreszenz/Immunzytochemie, Immunhistochemie (Paraffin) und ELISA gemeldet; für andere Anwendungen ist möglicherweise eine weitere Optimierung erforderlich.

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