Anti-HSP47/SERPINH1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P50454

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HSP47/SERPINH1-Funktion und Lokalisierung

• HSP47, auch bekannt als Serpin H1, ist ein 47 kDa Hitzeschockprotein (Colligin), das zur Serpin-Superfamilie gehört und beim Menschen durch das SERPINH1-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als kollagenspezifisches molekulares Chaperon im endoplasmatischen Retikulum und ist für die korrekte Kollagenbiosynthese, -faltung und -trimerisierung unerlässlich.
• Das Protein befindet sich im Lumen des endoplasmatischen Retikulums, wo es vorübergehend mit Prokollagen-Zwischenprodukten assoziiert, um eine vorzeitige Aggregation zu verhindern.
• Alternative Namen sind CBP1, CBP2, gp46, AsTP3, PIG14, RA-A47 und SERPINH2, was seine Entdeckung in verschiedenen zellulären und pathologischen Kontexten widerspiegelt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und N-Glykosylierung, die seine Aktivität und Stabilität regulieren können.
• Die HSP47-Expression wird unter Stressbedingungen (z.B. Hitzeschock) hochreguliert und ist für die Kollagenhomöostase in Bindegeweben kritisch; Mutationen in SERPINH1 sind mit Osteogenesis imperfecta assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 139–418 von humanem HSP47/SERPINH1 (NP_001226.2), exprimiert als rekombinantes Fusionsprotein. Diese Region deckt einen wesentlichen Teil der Serpin-Domäne ab und präsentiert wahrscheinlich mehrere Epitope für die polyklonale Antikörpergenerierung.
• Im Western Blot (WB) ist unter reduzierenden und denaturierenden Bedingungen eine Bande bei etwa 46 kDa zu erwarten. Validieren Sie den Nachweis in relevanten Zelllinien oder Geweben, die Kollagen exprimieren (z.B. Fibroblasten, Osteoblasten). Verwenden Sie geeignete Ladekontrollen.
• Für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ist eine Permeabilisierung (z.B. mit Triton X-100 oder Saponin) erforderlich, um Zugang zum ER-Lumen zu erhalten. Erwarten Sie ein retikuläres Färbemuster, das für ER-Proteine typisch ist. Färben Sie zur Bestätigung mit einem ER-Marker gegen.
• In ELISA sollten Antikörperspezifität und -titer unter Verwendung von rekombinantem HSP47 oder Zelllysaten optimiert werden. Als polyklonales Reagenz muss die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz für quantitative Assays verifiziert werden.
• Die Kreuzreaktivität mit murinem HSP47 ist bestätigt; für andere Spezies sollte die Sequenzhomologie vor der Verwendung überprüft werden.

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