Anti-HSP40 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, FC, ELISA - P25685

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von HSP40/DNAJB1

• Proteinidentität: DNAJB1 (auch bekannt als HSP40, Hdj1, HDJ-1) ist ein menschliches molekulares Chaperon, das zur DnaJ/HSP40-Familie gehört, mit zwei durch alternatives Spleißen gebildeten Isoformen.
• HSP70-Co-Chaperon-Aktivität: Es bindet an HSP70-Proteine und stimuliert deren ATPase-Aktivität, was für das Protein-Folding und die Verhinderung von Aggregationen unerlässlich ist.
• Chaperon-Adapter-Funktion: Zusammen mit TTC1 wirkt es als Chaperon-Adapter, der das HSP70-abhängige Folding durch Wechselwirkung mit der Amino-terminalen Region von HSP70 reguliert (PubMed:14503850).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:14503850
• Regulierung der Hitzeschockreaktion: Es reguliert die Hitzeschock-induzierte transkriptionelle Aktivität von HSF1 während der Dämpfungs- und Erholungsphase negativ und moduliert so die zelluläre Stressreaktion (PubMed:9499401).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:9499401
• Stabilisierung des HSC70-HIP-Komplexes: DNAJB1 stimuliert die Assoziation zwischen dem konstitutiven Chaperon HSC70 und dem Co-Chaperon HIP und verbessert so die Proteinkontrollqualität.
• ATP-Hydrolyse und Faltungskatalyse: In vitro stimuliert es die ATP-Hydrolyse und Faltung ungefalteter Proteine, die durch HSPA1A/B (HSP70-1) vermittelt wird, und zeigt eine direkte Chaperon-Aktivität (PubMed:24318877).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:24318877
• Subzelluläre Lokalisierung: Das Protein findet sich im Zytoplasma, Kern und Nukleolus und wechselt unter normalen und Stressbedingungen zwischen diesen Kompartimenten.
• Posttranslationale Modifikationen: Es ist ein Phosphoprotein, und seine Aktivität kann durch Phosphorylierung reguliert werden; zusätzliche Proteomik-Daten bestätigen seine Identität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Immunogen-Design: Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid innerhalb der Aminosäuren 241–340 von menschlichem DNAJB1 hergestellt, einer Region, die im nativen Protein wahrscheinlich exponiert ist und über Mensch, Maus und Ratte hinweg konserviert ist, was mit der beobachteten Kreuzreaktivität übereinstimmt.
• Western Blot (WB): Verwenden Sie für WB Hitzeschock- oder stressinduzierte Zelllysate als positive Kontrolle; erwarten Sie Bänder in der Nähe von 27 kDa und 38 kDa (entsprechend verschiedenen Isoformen oder Modifikationen). Optimieren Sie die Beladung und Detektionsantikörper basierend auf Ihrer Probe.
• Durchflusszytometrie (intrazellulär): Für den intrazellulären FC sind Permeabilisierung und Fixierung erforderlich, um zytoplasmatisches und nukleäres HSP40 nachzuweisen; validieren Sie die Färbung mit hitzeschockbehandelten gegenüber unbehandelten Zellen.
• ELISA-Anwendungen: Dieser monoklonale Antikörper kann als Fang- oder Nachweisreagenz in einem Sandwich-ELISA verwendet werden; eine geeignete Paarung mit einem Nachweisantikörper (z. B. einem polyklonalen Anti-HSP40) sollte getestet werden.

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