Anti-HSF1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q00613

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HSF1-Funktion und Lokalisierung

• HSF1 ist ein stress-induzierbarer Transkriptionsfaktor, der die Hitzeschockantwort (HSR) master-reguliert, indem er die Expression von molekularen Chaperonen und Hitzeschockproteinen (HSPs) antreibt (PubMed:11447121, PubMed:12659875, PubMed:12917326).
  Verwandte Referenzen: PMID:11447121, PMID:12659875, PMID:12917326
• In nicht gestressten Zellen wird HSF1 als inaktives Monomer in einem Komplex mit HSP90 gehalten; unter Stress homotrimerisiert es, translokiert in den Zellkern und aktiviert die Transkription (PubMed:11583998, PubMed:16278218, PubMed:9727490).
  Verwandte Referenzen: PMID:11583998, PMID:16278218, PMID:9727490
• HSF1 bindet an invertierte 5'-NGAAN-3' Pentamer-DNA-Sequenzen und assoziiert mit Chromatin an Hitzeschockgen-Promotoren, um die Genexpression anzutreiben (PubMed:1986252, PubMed:26727489, PubMed:25963659).
  Verwandte Referenzen: PMID:1986252, PMID:26727489, PMID:25963659
• Über die Transkription hinaus ist HSF1 an der mRNA-Verarbeitung und dem Kernexport von HSP70-Transkripten beteiligt und reguliert den mitotischen Fortschritt und die DNA-Schadensreparatur über die Unterdrückung der nicht-homologen Endverknüpfung (NHEJ) (PubMed:14707147, PubMed:17897941, PubMed:18794143, PubMed:26359349).
  Verwandte Referenzen: PMID:14707147, PMID:17897941, PMID:18794143, PMID:26359349
• HSF1 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität modulieren.
• Bei HIV-1-Infektion kann HSF1 die latente virale Transkription reaktivieren, indem es an das LTR bindet und die Elongationsfaktoren CDK9 und CCNT1 rekrutiert.
• HSF1 lokalisiert dynamisch zum Zellkern, Zytoplasma, Spindelpol, Zentrosom und Kinetochor, was seine vielfältigen zellulären Funktionen widerspiegelt.
• Das humane HSF1-Gen (GeneID: 3297) produziert über alternatives Spleißen mehrere Isoformen; die vorherrschende Form wandert bei ~57 kDa, und eine alternative Isoform wird bei ~52 kDa beobachtet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 367-529) zielt auf die C-terminale Region von HSF1 ab, die Transaktivierungs- und Regulationsdomänen umfasst, und gewährleistet so die Erkennung von Voll-Länge und potenziellen Isoformen.
• Für WB sind Banden nahe 52–57 kDa zu erwarten; ziehen Sie in Betracht, Lysate aus hitzegeschockten HeLa- oder Jurkat-Zellen als positive Kontrollen zu verwenden und mit Knockdown- oder Negativ-Zelllinien zu validieren.
• Optimieren Sie in IHC-P-Experimenten die Antigen-Retrieval (z.B. Citratpuffer pH 6.0) und validieren Sie Färbemuster in bekannten HSF1-exprimierenden Geweben (z.B. Hoden) oder hitzegestressten Proben.
• Für ELISA verwenden Sie rekombinantes HSF1-Protein, um die Antikörperbindung zu bestätigen und die optimale Arbeitskonzentration durch Schachbrett-Titration zu bestimmen.

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