Anti-HSD3B2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P26439

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HSD3B2-Funktion und -Lokalisierung

• HSD3B2 (3-beta-HSD II) wird vom HSD3B2-Gen kodiert und gehört zur Familie der 3-Beta-Hydroxysteroid-Dehydrogenasen/Isomerasen. Es wird vorwiegend in der Nebenniere, im Hoden und im Eierstock exprimiert, wo es einen Schlüsselschritt der Steroidhormonbiosynthese katalysiert.
• Das Enzym fungiert als bifunktioneller Katalysator: Es oxidiert Delta(5)-en-3-beta-hydroxy Steroide zu Delta(4)-en-3-keto Steroiden und isomerisiert sie anschließend zu aktiven hormonellen Steroiden. Diese Aktivität ist essentiell für die Produktion von Progesteron, Glukokortikoiden, Mineralokortikoiden und Sexualsteroiden.
• HSD3B2 ist sowohl in der Membran des endoplasmatischen Retikulums als auch in der Mitochondrienmembran lokalisiert, wobei Transmembrandomänen es an diese Organellen verankern. Diese duale Lokalisierung unterstützt seine Rolle bei mehreren Schritten der Steroidogenese.
• Klinische Bedeutung: Mutationen in HSD3B2 sind mit kongenitaler Nebennierenhyperplasie (CAH) assoziiert, einer Störung, die durch eine beeinträchtigte Cortisol- und Aldosteronsynthese gekennzeichnet ist, was zu einer Nebenniereninsuffizienz und unterschiedlich stark ausgeprägter sexueller Ambiguität führt.
• Das Immunogen des Antikörpers deckt die Aminosäuren 1-287 des Volllängenproteins (Referenzsequenz NP_000189.1) ab, was die katalytische Domäne umfasst und die Erkennung des nativen Enzyms in humanen und murinen Proben gewährleistet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western Blot wird eine Bande von ca. 42 kDa in Lysaten von menschlichen Nebennieren-, Hoden- oder Eierstockzelllinien oder -geweben erwartet. Auch Mausproben mit bestätigter Expression können verwendet werden, aber die Reaktivität des Antikörpers in der Maus sollte in Ihrem spezifischen System validiert werden.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC sind Färbemuster zu erwarten, die mit der Lokalisierung im endoplasmatischen Retikulum und in den Mitochondrien konsistent sind. Verwenden Sie organspezifische Marker und geeignete Permeabilisierungsmethoden, um die subzelluläre Verteilung zu bestätigen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann er aufgrund der Erkennung mehrerer Epitope ein stärkeres Signal liefern, jedoch können Chargenunterschiede auftreten. Erwägen Sie, in jedem Experiment einen bekannten positiven Kontrollwert (z. B. rekombinantes HSD3B2-Protein) einzubeziehen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden, aber optimale Verdünnungen und Paarungsbedingungen müssen empirisch ermittelt werden.

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