Anti-HSD3B1 Poliklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA – P14060

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von HSD3B1

• HSD3B1 ist ein bifunktionelles Enzym der 3-Beta-Hydroxysteroid-Dehydrogenase/Isomerase-Familie. Es katalysiert die Oxidation und Isomerisierung von 3β-Hydroxy-Δ5-Steroid-Vorstufen zu 3-Oxo-Δ4-Steroiden – ein essenzieller Schritt bei der Biosynthese aller wichtigen Steroidhormone. Dazu gehört die Umwandlung von Pregnenolon zu Progesteron, 17α-Hydroxypregnenolon zu 17α-Hydroxyprogesteron, Dehydroepiandrosteron (DHEA) zu 4-Androstendion und Androstendiol zu Testosteron. Verwandte Referenzen: PMID:1401999 PMID:2139411
• Über die De-novo-Steroidogenese hinaus reguliert HSD3B1 die lokale Androgen-Bioverfügbarkeit durch Interkonversion von aktiven und inaktiven 5α-reduzierten Androgenen. Es inaktiviert Dihydrotestosteron (DHT) effizient durch Umwandlung in 5α-Androstanediol, einen Metaboliten, der nicht an den Androgenrezeptor bindet. Verwandte Referenzen: PMID:1401999 PMID:2139411
• HSD3B1 ist über eine Einzelpass-Transmembranhelix an intrazellulären Membranen verankert und lokalisiert sowohl an der Membran des endoplasmatischen Retikulums als auch an der Mitochondrienmembran.
• Das Enzym wird überwiegend in Plazenta und Haut exprimiert und kommt auch in signifikanten Mengen im Brustdrüsengewebe vor.
• Es wird unter mehreren funktionellen Schlüsselwörtern klassifiziert: multifunktionelles Enzym, NAD/NADP-abhängige Oxidoreduktase, Isomerase, Steroidmetabolismus und Lipidmetabolismus – dies unterstreicht seine zentrale Rolle in steroidogenen und metabolischen Signalwegen.
• Laut UniProt wird davon ausgegangen, dass HSD3B1 NAD+ als bevorzugten Elektronendonor für seine Dehydrogenase-Aktivität und NADPH für die Reduktase-Aktivität verwendet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem volllängen menschlichen HSD3B1-Protein (Aminosäuren 1-290), was eine polyklonale Reaktion gegen multiple Epitope erzeugen kann. Für Western Blot empfehlen sich Positivkontroll-Lysate aus Plazenta- oder Brustgewebe oder Zelllinien mit hoher endogener HSD3B1-Expression (z. B. Brust- oder Prostatakrebszellen).
• Das vorausgesagte Molekulargewicht beträgt ca. 42 kDa. Aufgrund der Membranlokalisation sorgen Sie für ausreichende Solubilisierung durch Verwendung geeigneter Lysepuffer mit Detergenzien (z. B. RIPA-Puffer) und vermeiden Sie das Kochen von Proben bei übermäßig hohen Temperaturen, um Aggregation zu verhindern.
• Für Immunfluoreszenz (IF-P) fügen Sie einen Permeabilisierungsschritt hinzu (z. B. 0,1 % Triton X-100), damit der Antikörper Zugang zu intrazellulären Membrankompartimenten hat. Eine Co-Färbung mit ER- oder Mitochondrien-Markern kann die erwartete subzelluläre Lokalisierung bestätigen.
• Der Antikörper hat bestätigte Kreuzreaktivität mit Proben von Menschen, Mäusen und Ratten. Überprüfen Sie die Eignung für andere Spezies anhand der Sequenzhomologie und führen Sie einen Pilotversuch durch.
• Als polyklonaler Antikörper kann die Charge-zu-Charge-Konsistenz variieren. Erwägen Sie Aliquotierung und Gradienten-Tests bei der Optimierung für neue Assays und validieren Sie die Leistung in Ihrem eigenen Probensystem.

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