Anti-HP1-Alpha/CBX5-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P45973

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HP1-Alpha/CBX5

• HP1-Alpha (CBX5) ist eine Kernkomponente des Heterochromatins, die an Lys-9 methylierte Histon-H3-Schwänze (H3K9me) erkennt und bindet, was zur epigenetischen Repression führt. Zugehörige Referenzen: PMID:40440427
• Es wird aus dem Chromatin ausgeschlossen, wenn Histon H3 an Tyr-41 phosphoryliert ist (H3Y41ph), wodurch seine repressive Aktivität moduliert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:19783980
• HP1-Alpha interagiert außerdem mit Histon H1.4, das an Lys-26 methyliert ist (H1.4K26me); diese Bindung wird jedoch durch gleichzeitige Phosphorylierung an Ser-27 (H1.4S27Ph) gestört. Zugehörige Referenzen: PMID:16127177
• Es kann die Verbindung des Heterochromatins mit der inneren Kernmembran durch Interaktion mit dem Lamin-B-Rezeptor (LBR) fördern. Zugehörige Referenzen: PMID:19783980
• HP1-Alpha ist für den Aufbau des Kinetochors und die Bildung des inneren Zentromers essenziell und wirkt dabei über die NSL1-Untereinheit des MIS12-Komplexes. Zugehörige Referenzen: PMID:19783980, PMID:20231385
• Auf subzellulärer Ebene befindet es sich im Zellkern und ist an Chromosomen und Zentromeren angereichert.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen von HP1-Alpha gehören Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Chromatinassoziation und Funktion regulieren können.
• Das Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von 22,2 kDa, was mit der beobachteten Bande bei etwa 22 kDa übereinstimmt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den 100 N-terminalen Aminosäuren des humanen HP1-Alpha. Ziehen Sie einen Sequenzvergleich in Betracht, um die Epitopkonservierung über verschiedene Arten und Isoformen hinweg zu beurteilen.
• Beim Western Blot wird eine Bande bei ungefähr 22 kDa erwartet. Verwenden Sie standardmäßige SDS-PAGE- und Transferbedingungen und optimieren Sie die Antikörperverdünnung für Ihre Probe.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC ist eine Kernfärbung mit zentromeren Foci zu erwarten. Validieren Sie die Lokalisation mithilfe geeigneter Gegenfärbungen und Kontrollen.
• Für ELISA titrieren Sie das Beschichtungsantigen und den Detektionsantikörper, um optimale Signal-Rausch-Verhältnisse zu ermitteln.
• Die Kreuzreaktivität wurde für humane und murine Proben nachgewiesen. Für andere Arten sollten Sie eine In-silico-Vorhersage durchführen und diese experimentell überprüfen.

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