Anti-Homer1-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA – Q86YM7

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Homer1

• Homer1 ist ein Gerüstprotein der postsynaptischen Dichte, das vom HOMER1-Gen kodiert wird. Durch alternatives Spleißen werden mehrere Isoformen (z. B. Isoformen 1 und 3) gebildet, wobei Isoform 3 als dominant-negativer Regulator fungiert.
• Es bindet und verknüpft metabotrope Glutamatrezeptoren der Gruppe I (GRM1 und GRM5) mit intrazellulären Proteinen wie ITPR1, SHANK1 und SHANK3 und koppelt dadurch die Aktivierung von Oberflächenrezeptoren an die intrazelluläre Kalziumfreisetzung aus dem endoplasmatischen Retikulum.
• Isoform 1 reguliert den Transport und die Oberflächenexpression von GRM5, während Isoform 3 dynamisch mit Isoform 1 konkurriert, um die metabotrope glutamaterge Funktion an Synapsen fein abzustimmen, und an strukturellen Veränderungen während der lang anhaltenden neuronalen Plastizität und Entwicklung beteiligt ist.
• Durch seine Verbindung mit SHANK1 bildet Homer1 einen höhergeordneten Komplex, der für die strukturelle und funktionelle Integrität dendritischer Dornenfortsätze entscheidend ist (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Über das Nervensystem hinaus reguliert Homer1 die Aktivierung von T-Zellen negativ, indem es den Calcineurin-NFAT-Signalweg hemmt, mit Calcineurin um die Bindung an das NFAT-Protein konkurriert und die Dephosphorylierung sowie Aktivierung von NFAT verhindert. Zugehörige Referenzen: PMID:18218901
• Auf subzellulärer Ebene ist Homer1 vorwiegend im Zytoplasma, in der postsynaptischen Dichte, an erregenden Synapsen und in den dendritischen Dornenfortsätzen von Neuronen lokalisiert.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung und enthält eine Coiled-Coil-Domäne, die für die Multimerisierung wichtig ist.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 170–354, eine Region, die Coiled-Coil- oder Linkersequenzen enthalten kann; der Antikörper erkennt möglicherweise alle Homer1-Isoformen, die dieses Epitop gemeinsam haben.
• Für den Western Blot sollten reduzierende Bedingungen und eine geeignete Positivkontrolle wie ein Lysat aus humanem oder Rattenhirn verwendet werden; die erwartete Bandengröße beträgt etwa 40 kDa, wobei die Migration je nach Isoform variieren kann.
• Optimieren Sie bei Immunfluoreszenz und Immunhistochemie die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle. Bei Paraffinschnitten sollten außerdem geeignete Bedingungen für die Antigenretrieval bestimmt werden, um die Zugänglichkeit des Epitops zu erhalten.
• Wenn zwischen Homer1A, Homer1B und Homer1C unterschieden werden muss, sollte die Isoformspezifität mittels siRNA-Knockdown oder isoformspezifischer Konstrukte überprüft werden.
• Die Antikörperleistung im ELISA kann anhand von rekombinantem Homer1-Protein oder Zelllysaten beurteilt werden. Dabei sollte auf die Zusammensetzung von Blockierungs- und Waschpuffer geachtet werden, um unspezifische Bindungen zu reduzieren.

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