Anti-hnRNP U Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q00839

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: hnRNP U-Funktion und Lokalisierung

• hnRNP U ist ein multifunktionales DNA- und RNA-bindendes Protein, das die Chromatinarchitektur organisiert, indem es an Chromatin-assoziierte RNAs (caRNAs) und Gerüst-/Matrix-Bindungsregionen (S/MAR)-Elemente bindet, was für die Aufrechterhaltung der genomischen Stabilität wesentlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:1324173, PMID:8174554, PMID:10671544, PMID:11003645, PMID:11909954, PMID:28622508
• Es wirkt als Transkriptionsregulator, indem es die Assemblierung des Präinitiationskomplexes durch TFIIH-Interaktion fördert, während es gleichzeitig die Elongation durch Blockierung der CTD-Phosphorylierung der RNA-Pol II hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:10490622, PMID:15711563
• hnRNP U ist entscheidend für die X-Chromosom-Inaktivierung, indem es direkt an die lange nicht-kodierende Xist-RNA bindet und sie am inaktiven X-Chromosom verankert.
• Das Protein moduliert alternatives Spleißen durch Regulierung der U2-snRNP-Biogenese und Bindung an G/U-reiche Regionen in prä-mRNAs, einschließlich SMN1/2. Verwandte Referenzen: PMID:22325991
• Es reguliert die mRNA-Stabilität und erhöht die Expression von Zielgenen wie MYC und TNFA durch Interaktionen mit dem CRD-vermittelten Komplex und 3'-UTRs. Verwandte Referenzen: PMID:17174306, PMID:17289661, PMID:19029303
• Während der Mitose ist die Phosphorylierung an Ser-59 durch PLK1 für eine korrekte Chromosomenausrichtung und -segregation erforderlich, und es trägt zur Spindelorganisation bei. Verwandte Referenzen: PMID:21242313, PMID:25986610
• hnRNP U ist überwiegend nukleär lokalisiert, findet sich aber auch in zytoskelettalen Strukturen wie Zentrosomen, Kinetochoren, Spindelpolen und Midbody während der Zellteilung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Angesichts des Immunogendesigns (C-terminales Fragment, a.a. 608-825) wird erwartet, dass dieser polyklonale Antikörper sowohl das vollständige hnRNP U als auch potenzielle Spleißvarianten, die diese Region enthalten, detektiert.
• Für Western Blot wird eine Bande bei ~91 kDa erwartet; verwenden Sie Ganzzell- oder Kernextrakte aus humanen, murinen oder Rattengeweben/-zellen als positive Kontrollen.
• Bei der Durchführung von Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um die Kernarchitektur zu erhalten, da hnRNP U sowohl nukleäre als auch mitotische Apparat-Lokalisierung aufweist.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigen-Demaskierung erforderlich sein; validieren Sie mit bekannten positiven und negativen Gewebeproben.
• Für die Immunpräzipitation (IP) sollten Sie Kernlysate verwenden und ko-präzipitierte Nukleinsäuren oder Proteinpartner validieren, wenn Chromatin-/RNA-Interaktionen untersucht werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet, überprüfen Sie jedoch stets die Reaktivität in Ihrem spezifischen Proben-System.

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