Anti-hnRNP K Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P61978

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: hnRNP K Funktion und Lokalisierung

• hnRNP K ist ein wichtiges prä-mRNA-bindendes Protein mit hoher Affinität zu Poly(C)-Sequenzen und spielt eine zentrale Rolle im hnRNA-Stoffwechsel, Spleißen und der mRNA-Verarbeitung.
• Es ist ein kritischer Vermittler der p53/TP53-DNA-Schadensantwort und fungiert sowohl als transcriptionaler Coaktivator (wenn sumoyliert) für Gene wie p21/CDKN1A als auch als Repressor durch Interaktionen mit nicht-kodierenden RNAs wie lincRNA-p21, wodurch Apoptose und Zellzyklusarrest reguliert werden.
• Als Teil eines Ribonukleoprotein-Komplexes, der ZNF827, HNRNPL und circZNF827 enthält, reguliert hnRNP K die Transkription von Genen, die an der neuronalen Differenzierung beteiligt sind, negativ (PubMed:33174841). Verwandte Referenzen: PMID:33174841
• Das Protein lokalisiert sich dynamisch in mehrere subzelluläre Kompartimente: Kern, Nukleoplasma, Zytoplasma und Podosomen, was seinen Rollen in der RNA-Verarbeitung, Signalisierung und Zelladhäsion entspricht.
• hnRNP K unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung, Sumoylierung und Glykosylierung, die seine Aktivität, Lokalisierung und Interaktionsnetzwerke modulieren.
• Es besitzt eine einzelsträngige DNA-Bindungsaktivität und ist an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt, was seinen vielseitigen Beitrag zur zellulären Homöostase und Pathogenese unterstreicht.
• Alternatives Spleißen der HNRNPK-prä-mRNA erzeugt mehrere Isoformen, obwohl ihre funktionellen Unterschiede hier nicht vollständig charakterisiert sind.
• Schlüsselwörter von UniProt umfassen: mRNA-Verarbeitung, Spleißosom, Transkriptionsregulation, Aktivator, Repressor und intellektuelle Behinderung, was seine breiten regulatorischen Rollen in der Genexpression und Krankheit unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1-100 von humanem hnRNP K abdeckt; der Sequenzabgleich mit Maus- und Ratten-Orthologen zeigt eine signifikante Homologie, was die berichtete Kreuzreaktivität unterstützt. Validieren Sie die Spezifität in Ihrer Zielspezies und Ihrem Gewebe.
• Im Western Blot (WB) wird ein dominantes Band um 49-51 kDa erwartet; aufgrund umfangreicher posttranslationaler Modifikationen können jedoch mehrere Bänder oder leichte Massenverschiebungen beobachtet werden. Verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und Positivkontrollen (z. B. HeLa- oder HEK293-Ganzzelllysate).
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) analysieren Sie die subzellulären Lokalisierungsmuster: Erwarten Sie sowohl kern- als auch zytoplasmische Färbung. Optimieren Sie die Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0) und Permeabilisierungsschritte. Erwägen Sie die Verwendung von Podosomen-Markern für Kollokalisierungsstudien.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz dienen; jedoch müssen die Assay-Bedingungen (Coating-Puffer, Blockierung, Waschschritte) und die Antikörper-Paarung empirisch bestimmt werden.
• Angesichts der Beteiligung von hnRNP K an der p53-Signalisierung kann die Bewertung von Expressionsänderungen nach Induktion von DNA-Schäden (z. B. durch Doxorubicin oder UV-Behandlung) als Strategie zur funktionalen Validierung dienen.

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