Anti-HNF4A-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P41235

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Hepatocyte Nuclear Factor 4-alpha

• HNF4A, auch bekannt als Nuclear Receptor Subfamily 2 Group A Member 1 (NR2A1) und Transcription Factor 14 (TCF14), ist ein Mitglied der Kernrezeptorfamilie, der als ligandenaktivierter Transkriptionsfaktor fungiert.
• In der Leber steuert HNF4A die Expression hepatischer Gene während der Differenzierung von Entoderm- zu hepatischen Vorläuferzellen, indem es die Rekrutierung von RNA-Polymerase II an Zielpromotoren erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:30597922
• Es unterdrückt das CLOCK-BMAL1-Transkriptionskomplex und ist für die Aufrechterhaltung der zirkadianen Rhythmik und die Periodenregulation in Leber- und Dickdarmzellen unerlässlich. Verwandte Referenzen: PMID:30530698
• HNF4A lokalisiert ausschließlich im Zellkern, wo es an spezifischen Response-Elementen an die DNA bindet.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung-ähnlicher Konjugation, modulieren seine transkriptionelle Aktivität und Protein-Stabilität.
• Mutationen in HNF4A sind mit Maturity-Onset Diabetes of the Young Typ 1 (MODY1) und anderen Stoffwechselstörungen verbunden, was seine Rolle bei der Glukosehomöostase unterstreicht.
• Die Verwendung alternativer Promotoren und Spleißen erzeugt multiple Isoformen (z. B. HNF4a7, HNF4a8, HNF4a9), die gewebsspezifische Funktionen haben können.
• Das Protein enthält konservierte Zinkfingerdomänen für die DNA-Bindung und eine für Kernrezeptoren charakteristische Ligandenbindedomäne.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das einer Sequenz innerhalb der Aminosäuren 226–325 von menschlichem HNF4A entspricht. Erwägen Sie die Überprüfung der Isoform-Reaktivität, wenn Sie spezifische Spleißvarianten anzielen.
• Für Western Blots beträgt das vorhergesagte Proteingewicht 53 kDa. Die Verwendung von Kernextrakten aus menschlicher Leber oder Dickdarmgewebe/-zellen kann das Signal verbessern.
• Bestätigen Sie die Spezifität durch Knockdown- oder Überexpressionsexperimente und fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu.
• In ELISA kann das Immunogen-Peptid als positive Kontrolle dienen; testen Sie gegen das全长-rekombinante Protein, um die Bindung zu validieren.
• Polyklonale Antikörper können Chargenunterschiede aufweisen; standardisieren Sie Ihr Protokoll bei Verwendung einer neuen Charge neu.

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