Anti-HNF1α Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P20823

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HNF1α-Funktion und -Lokalisierung

• Hepatocyte nuclear factor 1-alpha (HNF1α) ist ein Transkriptionsfaktor, der durch das HNF1A-Gen kodiert wird; alternatives Spleißen erzeugt multiple Isoformen (UniProt KB-Schlüsselwörter: Alternative splicing).
• Fungiert als transkriptioneller Aktivator, der die gewebsspezifische Genexpression reguliert, hauptsächlich in Pankreas-Inselzellen und der Leber (By similarity). Er bindet an das invertierte Palindrom 5'-GTTAATNATTAAC-3', um die Transkription der Zielgene zu steuern (PubMed:10966642, PubMed:12453420). Verwandte Referenzen: PMID:10966642 PMID:12453420
• Aktiviert die Transkription von Cytochrom P450-Enzymen wie CYP1A2, CYP2E1 und CYP3A11 und verknüpft es damit mit Arzneimittelstoffwechselwegen (By similarity).
• Spielt eine entscheidende Rolle bei der Gentranskription und DNA-Replikation des Hepatitis-B-Virus (HBV), indem es mit NR5A2 synergisiert, um die Aktivität des viralen Enhancers II (ENII) zu verstärken (Microbial infection).
• Die subzelluläre Lokalisierung ist ausschließlich nukleär, was mit seiner Rolle als DNA-bindender Transkriptionsfaktor übereinstimmt (UniProt: Nucleus).
• Wird überwiegend in der Leber exprimiert, wo es ein Netzwerk von hepatozytenspezifischen Genen steuert (UniProt-Gewebsspezifität: Liver).
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation (Schlüsselwörter: Phosphoprotein, Ubl conjugation), und das Protein ist bekannt dafür, eine Homeobox-Domäne zu enthalten (Schlüsselwörter: Homeobox, DNA-binding).
• Klinisch sind Mutationen in HNF1A mit Diabetes des jungen Erwachsenen Typ 3 (MODY3) und Diabetes mellitus assoziiert (Schlüsselwörter: Diabetes mellitus, Disease variant).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 30–130 von humanem HNF1α, was Teile der N-terminalen Domäne umfasst; berücksichtigen Sie eine potenzielle Kreuzreaktivität mit anderen Homeobox-haltigen Proteinen und validieren Sie die Spezifität mittels Knockout- oder siRNA-basierten Kontrollen.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 67 kDa; verwenden Sie positive Kontrolllysate aus Leber- oder Pankreas-Inselzelllinien (z. B. HepG2 oder MIN6), um die Bande zu bestätigen. Migrationsbanden können aufgrund von Phosphorylierung oder anderen Modifikationen verschoben sein; eine Phosphatasebehandlung kann helfen, den Modifikationsstatus zu überprüfen.
• Bei ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Konzentrationen des Beschichtungsantigens und die Nachweisbedingungen; fügen Sie rekombinantes HNF1α-Protein oder Peptid-Wettbewerbsassays hinzu, um die Antikörperspezifität zu bewerten.
• Es wurde berichtet, dass der Antikörper mit murinem und rattigem HNF1α kreuzreagiert; bei Verwendung in anderen Arten führen Sie zusätzliche Validierungsexperimente durch, um die Reaktivität zu bestätigen.
• Angesichts der Beteiligung von HNF1α an der Biologie des Hepatitis-B-Virus kann dieser Antikörper nützlich für die Untersuchung von Wirt-HBV-Interaktionen sein; jedoch sind geeignete virale Modelle und Kontrollen erforderlich.

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