Anti-HMGCL polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P35914

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HMGCL

• HMGCL (Hydroxymethylglutaryl-CoA-Lyase, mitochondrial) ist ein Schlüsselenzym der Ketogenese und Leucinkatabolie, das die Spaltung von (S)-3-Hydroxy-3-methylglutaryl-CoA zu Acetyl-CoA und Acetoacetat katalysiert.
• Es lokalisiert hauptsächlich zur mitochondrialen Matrix und kommt auch in Peroxisomen vor, was mit seiner Rolle im Lipidstoffwechsel übereinstimmt.
• Das Enzym hat die höchste Expression in der Leber, mit zusätzlicher Expression in Pankreas, Niere, Darm, Hoden, Fibroblasten und Lymphoblasten; sehr geringe Expression im Gehirn und Skelettmuskel.
• Eine alternative Spleiß-Isoform (Isoform 2) zeigt die höchste relative mRNA-Expression im Herzen (30 %), Skelettmuskel (22 %) und Gehirn (14 %).
• HMGCL ist eine metallbindende Lyase; seine Aktivität hängt von zweiwertigen Kationen ab und es gehört zur Familie der HMG-CoA-Lyasen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Disulfidbindungbildung, die seine Funktion oder Stabilität regulieren können.
• Mutationen in HMGCL sind mit der 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl-CoA-Lyase-Mangel verbunden, einer seltenen autosomal-rezessiven Stoffwechselerkrankung.
• Ketonkörper, die über diesen Weg produziert werden, dienen als alternative Energiequelle zu Glukose, insbesondere während des Fastens, und wirken als Lipidvorläufer und Stoffwechselregulatoren.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt das volle Länge humane HMGCL (Aa 1-325) ab, daher wird erwartet, dass der Antikörper das native Protein unter denaturierenden und nativen Bedingungen erkennt.
• Für den Western Blot ist eine Bande bei etwa 34 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Verwendung reduzierender Bedingungen und validieren Sie mit einem positiven Kontrolle wie Leberlysat.
• Bei IHC-P ist mit einer mitochondrialen Färbung in Geweben mit hoher HMGCL-Expression (z. B. Leber) zu rechnen; eine geeignete Antigen-Retrieval-Methode kann erforderlich sein.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus und Ratte; validieren Sie bei der Verwendung dieser Spezies die Spezifität im entsprechenden Gewebe- oder Zellsystem.
• Für ELISA erwägen Sie die Beschichtung mit dem rekombinanten Immunogen oder einem Peptid und optimieren Sie die Assaybedingungen empirisch.

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