Anti-HMGA1 Monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP-seq - P17096

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HMGA1-Funktion und -Lokalisierung

• HMGA1, auch bekannt als High-Mobility-Group-Protein HMG-I/HMG-Y oder AT-Hook-Protein 1, ist ein nicht-histonhaltiges Chromosomenprotein, das durch das HMGA1-Gen (GenID: 3159) kodiert wird. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Es bindet bevorzugt an die kleine Furche von A+T-reicher doppelsträngiger DNA und fungiert bei der Nukleosomenphasierung und Chromatinorganisation.
• HMGA1 ist an der transkriptionellen Regulation von Genen beteiligt, die A+T-reiche Regionen enthalten oder in deren Nähe positioniert sind, und beeinflusst die Genexpression.
• Das Protein lokalisiert sich im Kern und in den Chromosomen, wie durch seine subzelluläre Lokalisation angezeigt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, ADP-Ribosylierung, Methylierung, Phosphorylierung und ubiquitinähnliche Konjugation, die seine DNA-bindenden und regulatorischen Aktivitäten modulieren können können.
• HMGA1 wurde mit chromosomalen Umordnungen in Verbindung gebracht, was seine dynamische Rolle bei der genomischen Stabilität unterstreicht.
• Das Molekulargewicht des Proteins beträgt ca. 11,7 kDa (berechnet aus der Sequenz), obwohl es im SDS-PAGE bei etwa 12 kDa wandern kann.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Resten 1–107 von humanem HMGA1 (P17096) entspricht. Für den Western Blot beachten Sie, dass das vorhergesagte Molekulargewicht ~12 kDa beträgt; verwenden Sie einen geeigneten Gelanteil und Transferbedingungen für Proteine mit niedrigem Molekulargewicht.
• Für ChIP-seq validieren Sie die Antikörperspezifität mithilfe von Knockout- oder Knockdown-Kontrollen, da HMGA1 breit an A+T-reiche DNA bindet.
• Bei der Durchführung der Immunfluoreszenz stellen Sie sicher, dass eine Permeabilisierung erfolgt, um Kernziele zugänglich zu machen; beachten Sie, dass HMGA1 im Kern und in den Chromosomen lokalisiert ist.
• Für IHC-P ist möglicherweise eine Antigen-Retrieval erforderlich; optimieren Sie dies unter Verwendung von positiven Kontrollgeweben, von denen bekannt ist, dass sie HMGA1 exprimieren, wie z. B. proliferative Gewebe.

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