Anti-HLA-DRB4 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - P13762

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HLA-DRB4-Funktion und -Lokalisierung

• Dient als Beta-Kette der MHC-Klasse-II-DR-Moleküle und spielt eine zentrale Rolle im adaptiven Immunsystem, indem es Peptide aus endozytierten oder autophagen Quellen bindet und sie an CD4+ Helfer-T-Zellen präsentiert.
• Die Peptidbindungstasche nimmt Peptide von 10–30 Resten auf, die hauptsächlich von Proteinen stammen, die im endosomalen/lysosomalen Weg der antigenpräsentierenden Zellen (APCs) wie dendritischen Zellen, Makrophagen und B-Zellen abgebaut werden.
• Die Assembly beginnt im endoplasmatischen Retikulum durch Bildung eines Heterononamers mit CD74 (invariante Kette), das den Komplex in die Antigenprozessierungskompartimente lenkt und eine vorzeitige Peptidbindung verhindert.
• In späten Endosomen/Lysosomen wird CD74 sequenziell durch Kathepsine gespalten, und das verbleibende CLIP-Fragment wird durch die Wirkung von HLA-DM gegen hochaffine antigenische Peptide ausgetauscht; in B-Zellen und dendritischen Zellen moduliert HLA-DO diesen Austausch.
• Wird konstitutiv auf professionellen APCs exprimiert und auch auf gastrointestinalen Epithelzellen gefunden, wo es zur lokalen Immunüberwachung und oralen Toleranz beiträgt.
• Zyklisiert durch mehrere Membrankompartimente, einschließlich Zellmembran, endoplasmatisches Retikulum, Golgi-Netzwerk, Endosomen, Lysosomen und späte Endosomen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Disulfidbrücken, Isopeptidbindungen und potenzielle Ubiquitinierung – allesamt Einfluss nehmend auf Protein-Stabilität, Konformation und Trafficking.
• Hochgradig polymorph und an der Transplantationsimmunologie beteiligt; Diskrepanzen im Spender- und Empfänger-HLA-DR können alloreaktive T-Zell-Antworten auslösen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 50–150 innerhalb der extrazellulären Domäne zugeordnet ist; für Anwendungen, die die native Konformation erfordern (z. B. Durchflusszytometrie), überprüfen Sie, ob das Epitop auf lebenden Zellen zugänglich ist.
• Empfohlene Anwendungen umfassen Western Blot (WB) und ELISA; die typische WB-Detektion ergibt eine Bande nahe 30 kDa. Optimieren Sie die Antikörperverdünnungen unter Verwendung geeigneter menschlicher Zelllysate, wie z. B. der Raji- oder Daudi-B-Zelllinien.
• Eine Kreuzreaktivität wurde für den Menschen gezeigt; die Reaktivität mit Orthologen in anderen Spezies wurde nicht charakterisiert und sollte individuell getestet werden.
• Die genetische Homologie unter DRB-Genen kann zu einer Kreuzerkennung führen; Verwenden Sie siRNA-Knockdown oder CRISPR-basierte Knockout-Kontrollen, wenn eine isosformspezifische Diskriminierung für Ihre Studie entscheidend ist.
• Befolgen Sie Standardversand- und Lagerbedingungen: auf Eisbeuteln kühl halten, nach Erhalt aliquoten und wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen vermeiden.

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