Anti-HLA-DRB3 Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P79483

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HLA-DRB3-Funktion und -Lokalisierung

• HLA-DRB3 kodiert die Beta-Kette des MHC-Klasse-II-Moleküls, das sich mit der Alpha-Kette HLA-DRA paart, um ein Heterodimer auf der Oberfläche professioneller antigenpräsentierender Zellen (APCs) zu bilden.
• Der MHCII-Komplex präsentiert Peptidantigene (typischerweise 10–30 Aminosäuren aus endozytierten Proteinen) an CD4+-T-Zellen und steuert T-Helfer-Effektorfunktionen wie antikörpervermittelte Immunität und Makrophagenaktivierung (PubMed:16148104, PubMed:19531622, PubMed:19830726). Verwandte Referenzen: PMID:16148104, PMID:19531622, PMID:19830726
• Das Gen verfügt über mehrere Allele mit unterschiedlichen Peptidbindungs-Repertoires. ALLEL DRB3*01:01 präsentiert Tetanus-Toxin- und HHV-6B-Epitope (PubMed:19830726, PubMed:2463305, PubMed:2788702, PubMed:31020640). Verwandte Referenzen: PMID:19830726, PMID:2463305, PMID:2788702, PMID:31020640
• ALLEL DRB3*02:02 präsentiert Epitope von Tetanus-Toxin, EBV, HHV-6B, Dengue-Virus, IAV sowie Tumorantigenen WT1, NY-ESO-1 und TP53 (PubMed:19830726, PubMed:2788702, PubMed:23569328, PubMed:31308093, PubMed:31020640, PubMed:31333679, PubMed:22929521, PubMed:19531622, PubMed:20368442, PubMed:30282837). Verwandte Referenzen: PMID:19830726, PMID:2788702, PMID:23569328, PMID:31308093, PMID:31020640, PMID:31333679, PMID:22929521, PMID:19531622, PMID:20368442, PMID:30282837
• ALLEL DRB3*03:01 präsentiert Peptide von M. tuberculosis und HCV (PubMed:32341563, PubMed:2788702, PubMed:16148104). Verwandte Referenzen: PMID:32341563, PMID:2788702, PMID:16148104
• Subzellulär lokalisiert es sich an der Zellmembran sowie an Membranen des endoplasmatischen Retikulums, späten Endosomen, Lysosomen und Autolysosomen.
• Exprimiert in professionellen APCs: Monozyten/Makrophagen, dendritische Zellen und B-Zellen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Ubiquitinierung. Schlüsselwörter: Adaptive Immunität, MHC II, Glykoprotein, Signal, Transmembran.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 30–227, was darauf hindeutet, dass der Antikörper mehrere Epitope der extrazellulären Domäne erkennen kann. Validieren Sie in relevanten APC-Linien (z. B. Raji-B-Zellen, monozytenabgeleitete dendritische Zellen) für WB und ELISA.
• Für WB verwenden Sie reduzierendes SDS-PAGE und laden Sie 20–30 µg Lysat; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt unter reduzierenden Bedingungen ca. 30 kDa. Optimieren Sie die Blockierung mit 5 % BSA.
• Für ELISA beschichten Sie mit rekombinantem Protein oder Zelllysat bei 1–2 µg/mL; überprüfen Sie die Kreuzreaktivität gegen verwandte HLA-DR-Beta-Ketten.
• Vermeiden Sie mehrere Gefrier-Auftau-Zyklen und verwenden Sie frische Proteaseinhibitor-Cocktails, um die Integrität des Antigens zu erhalten.
• Kombinieren Sie mit einem geeigneten sekundären Antikörper und erwägen Sie eine Titration des primären Antikörpers (z. B. 1:500–1:2000 für WB), um den Hintergrund zu minimieren.

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