Anti-HLA-DRA-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – P01903

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von HLA-DRA

• HLA-DRA kodiert die α-Kette des MHC-Klasse-II-Moleküls HLA-DR, das mit der β-Kette (HLA-DRB) ein Heterodimer bildet, um Peptidantigene auf der Oberfläche professioneller antigenpräsentierender Zellen (APCs) zu präsentieren.
• Das HLA-DR-Heterodimer präsentiert extrazelluläre Peptidantigene (10–30 Aminosäuren) über den T-Zell-Rezeptor (TCR) an CD4+-T-Zellen und koordiniert dadurch adaptive Immunantworten, die durch T-Helferzellen vermittelt werden, einschließlich der Antikörperproduktion und Makrophagenaktivierung.
  Zugehörige Referenzen: PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Die Peptidbindung an MHCII ist durch einen großen hydrophoben Ankerrest an Position 1 des Peptid-N-Terminus gekennzeichnet, der für die hochaffine Wechselwirkung mit dem MHCII-Molekül entscheidend ist.
  Zugehörige Referenzen: PMID:8145819
• Im Tumormikromilieu vermittelt HLA-DRA die Präsentation von aus Tumoren stammenden Peptiden, die hauptsächlich von tumoransässigen APCs durch Phagozytose apoptotischer Tumorzellen oder Makropinozytose sezernierter Tumorproteine erzeugt werden.
  Zugehörige Referenzen: PMID:31495665
• HLA-DRA beteiligt sich an der makroautophagieabhängigen Präsentation intrazellulärer Antigene, einem Prozess, der für die Selektion von T-Zellen im Thymus und die zentrale Immuntoleranz essenziell ist.
  Zugehörige Referenzen: PMID:17182262 PMID:23783831
• Die Epitopauswahl für die HLA-DR-Präsentation folgt zwei Verarbeitungsmodi: „zuerst binden, später schneiden/trimmen“ für pathogenabgeleitete Antigene und „zuerst schneiden, später binden“ für Selbstpeptide.
  Zugehörige Referenzen: PMID:25413013
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert sich das Protein an der Zellmembran, im endoplasmatischen Retikulum, in frühen und späten Endosomen, Lysosomen und Autolysosomen, was seinen Transport durch den Weg der Antigenverarbeitung und -präsentation widerspiegelt.
• HLA-DRA wird auf Proteinebene in professionellen APCs wie Makrophagen, dendritischen Zellen und B-Zellen sowie in Thymusepithelzellen exprimiert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• Das Protein weist strukturelle Merkmale wie ein N-terminales Signalpeptid, eine Transmembranregion, Disulfidbrücken, Glykosylierung und Ubiquitinkonjugation auf, was seine komplexe Regulation und posttranslationale Modifikation unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 26–216 des humanen HLA-DRA (extrazelluläre Domäne) umfasst. Für ELISA sollte die Verwendung des rekombinanten Volllängenproteins als Positivkontrolle und Standard in Betracht gezogen werden.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 29 kDa. Stellen Sie einen vollständigen Proteintransfer sicher und verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker; validieren Sie das Ergebnis mit einer bekannten positiven Probe (Mensch, Maus oder Ratte).
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; die Sequenzhomologie sollte jedoch in silico überprüft und die Leistung des Antikörpers in Gewebe- oder Zelllysaten der entsprechenden Spezies titriert und bestätigt werden.
• Dieser polyklonale Antikörper eignet sich für WB und ELISA; für Anwendungen wie Immunhistochemie oder Durchflusszytometrie kann eine zusätzliche Validierung erforderlich sein.

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