Anti-HLA-DRA Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P01903

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HLA-DRA

• HLA-DRA ist die Alpha-Kette von MHC der Klasse II, auch bekannt als MHC-Klasse-II-Antigen DRA, und paart sich mit der Beta-Kette von HLA-DRB zum antigenpräsentierenden Komplex.
• In Komplex mit HLA-DRB präsentiert es antigene Peptide auf professionellen antigenpräsentierenden Zellen (APCs) für die Erkennung durch CD4+-T-Zellen und steuert die Effektorfunktionen von T-Helferzellen, einschließlich der antikörpervermittelten Immunantwort und Makrophagenaktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Es präsentiert typischerweise extrazelluläre Peptidantigene mit 10 bis 30 Aminosäuren, die durch Proteolyse von endozytierten Antigenen in Lysosomen entstehen. Verwandte Referenzen: PMID:8145819
• Im Tumormikromilieu präsentiert es antigene Peptide, die hauptsächlich in im Tumor ansässigen APCs generiert werden, wahrscheinlich durch Phagozytose apoptotischer Tumorzellen oder Makropinozytose sezernierter Tumorproteine. Verwandte Referenzen: PMID:31495665
• Es präsentiert Peptide, die aus intrazellulären Proteinen stammen, die nach Makroautophagie in Autolysosomen eingeschlossen sind – ein Mechanismus, der für die T-Zellselektion im Thymus und die zentrale Immuntoleranz relevant ist. Verwandte Referenzen: PMID:17182262 PMID:23783831
• Die Auswahl immunodominanter Epitope folgt zwei Verarbeitungsmodi: „Zuerst binden, dann schneiden/trimmen“ für Pathogen-abgeleitete Peptide und „Zuerst schneiden, dann binden“ für Autoantigene/eigene Peptide. Verwandte Referenzen: PMID:25413013
• Die Ankerrest an Position 1 des Peptid-N-Terminus, meist ein großer hydrophober Rest, ist essenziell für die hochaffine Interaktion mit MHCII-Molekülen. Verwandte Referenzen: PMID:8145819
• HLA-DRA lokalisiert sich an der Zellmembran, der Membran des Endoplasmatischen Retikulums, frühen/späten Endosomenmembranen, Lysosomenmembran und Autolysosomenmembran.
• Es wird in professionellen APCs (Makrophagen, dendritische Zellen, B-Zellen) und thymischen Epithelzellen exprimiert. Verwandte Referenzen: PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• Glykoprotein mit Disulfidbindungen und einer Transmembranhelix; es durchläuft posttranslationale Modifikationen, die für die Stabilität und Funktion von MHCII essenziell sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 100-200 von humanem HLA-DRA entspricht; für die analytische Validierung empfehlen wir die Verwendung von rekombinantem Vollängenprotein oder Zelllysaten, die native MHC-Klasse-II-Komplexe exprimieren.
• Für Western Blot (WB) wird unter reduzierenden Bedingungen eine Bande von etwa 29 kDa erwartet; optimieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers und verwenden Sie geeignete sekundäre Nachweisreagenzien.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigen-Retrieval erforderlich sein; es wird empfohlen, das Färbemuster in positiven Kontrollgeweben wie Lymphknoten oder Milz zu validieren.
• Stellen Sie bei ELISA eine optimale Beschichtung mit dem Zielantigen sicher und validieren Sie mit bekannten positiven und negativen Kontrollproben.
• Da dieser Antikörper gegen eine menschliche Sequenz entwickelt wurde, bestätigen Sie die Kreuzreaktivität bei der Verwendung von nicht-menschlichen Proben.

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