Anti-HLA-DQA1 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P01909

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: HLA-DQA1-Funktion und Lokalisierung

• HLA-DQA1 kodiert die Alpha-Kette des HLA-DQ-Moleküls (MHC-Klasse II), ein Heterodimer, das aus Alpha- (DQA1) und Beta- (DQB1) Untereinheiten besteht und auf antigenpräsentierenden Zellen (APCs) und bestimmten Epithelzellen zu finden ist.
• Als klassisches MHC-Klasse-II-Molekül präsentiert das DQ-Heterodimer exogene Peptidantigene (10–30 Reste), die über den endozytischen Weg aufgenommen wurden, an CD4+ T-Helferzellen und spielt so eine zentrale Rolle in der adaptiven Immunität.
• Im endoplasmatischen Retikulum assembliert das DQA1/DQB1-Heterodimer mit der invarianten Kette (CD74) zu einem Trimer und bildet einen nonameren Komplex, der zu Endosomen und Lysosomen transportiert wird, wo CD74 sequenziell abgebaut wird, wobei das CLIP-Fragment verbleibt, das unter Mithilfe von HLA-DM gegen antigene Peptide ausgetauscht wird.
• HLA-DQA1 ist ein Transmembran-Glykoprotein mit einer typischen Typ-I-Membrantopologie, das eine extrazelluläre Peptidbindedomäne, eine immunglobulinähnliche Domäne, eine einzelne Transmembranhelix und einen kurzen zytoplasmatischen Schwanz enthält.
• Intrazellulär wandert das Protein durch die ER-Membran, den Golgi-Apparat, das trans-Golgi-Netzwerk sowie die endosomalen/lysosomalen Membranen und befindet sich schließlich auf der Plasmamembran, was seine dynamische Rolle bei der Antigenverarbeitung und -präsentation widerspiegelt.
• Schlüsselwörter von UniProt (P01909) unterstreichen seine wesentliche Beteiligung an der adaptiven Immunität und der Bildung des MHC-II-Komplexes und weisen auf posttranslationale Modifikationen hin, einschließlich der Bildung von Disulfidbrücken und N-verknüpfter Glykosylierung, die für seine Struktur und Funktion entscheidend sind.
• Polymorphismen in HLA-DQA1, allein oder in Kombination mit HLA-DQB1, sind stark mit Zöliakie (daher der Alias CELIAC1) und anderen Autoimmunerkrankungen assoziiert, was seine klinische Relevanz unterstreicht.
• Neben professionellen APCs werden MHC-Klasse-II-Moleküle konstitutiv auf gastrointestinalen Epithelzellen exprimiert und tragen zur lokalen immunologischen Überwachung bei, ein charakteristisches Merkmal, das im GI-Trakt beobachtet wird.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser monoklonale Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid hergestellt, das einer internen Sequenz (aa 155-254) von humanem HLA-DQA1 entspricht, was darauf hindeutet, dass er ein lineares Epitop erkennt, das wahrscheinlich unter denaturierenden Bedingungen freigelegt wird, was seine Verwendung im WB unterstützt.
• Für den WB sollten Sie Ganzzelllysate oder membranangereicherte Fraktionen von menschlichen, murinen oder rattigen Immunzellen (z. B. Raji-B-Zellen, dendritische Zellen) unter reduzierenden Bedingungen auftrennen; eine Bande in der Nähe von 28 kDa wird für die glykosylierte Alpha-Kette erwartet.
• Bei der IHC-P kann eine Antigen-Retrieval die Färbung optimieren; Testen Sie an formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten menschlichen Tonsillen, Milz oder Darmgewebe sowie an lymphoiden Organen von Maus/Ratte und validieren Sie mit geeigneten Negativkontrollen.
• ELISA-Anwendungen können eine Optimierung des Beschichtungspuffers und des Detektionssystems erfordern; Erwägen Sie die Verwendung des Antikörpers in einem Sandwich-ELISA-Format mit einem passenden Detektionsantikörper, sofern verfügbar.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte kann dieser Antikörper in translationalen Modellen von Autoimmunität, Transplantation oder Infektionskrankheiten eingesetzt werden, aber bestätigen Sie stets die Spezifität im gewünschten experimentellen System.

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