Anti-HLA-DPB1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04440

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HLA-DPB1-Funktion und -Lokalisierung

• HLA-DPB1 (auch bekannt als DPB1, HLA-DP1B) kodiert die Betakette des HLA-Klasse-II-Histokompatibilitätsantigens DP, das sich mit der Alphakette (HLA-DPA1) paart, um ein funktionelles MHC-Klasse-II-Heterodimer auf antigenpräsentierenden Zellen zu bilden.
• Das Heterodimer bindet Peptide von 10-30 Resten, die von exogenen Antigenen stammen, die endozytiert und im endosomalen/lysosomalen Weg verarbeitet wurden, und präsentiert sie CD4+ T-Helferzellen, wobei es eine zentrale Rolle in der adaptiven Immunität spielt.
• Die Montage von MHC-Klasse-II-Molekülen erfolgt im endoplasmatischen Retikulum mit der invariante Kette (CD74), gefolgt von Transport zu endosomalen Kompartimenten, wo CD74 proteolytisch entfernt wird, wobei CLIP verbleibt, das dann gegen antigene Peptide ausgetauscht wird, was durch HLA-DM erleichtert wird.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die Zellmembran, das endoplasmatische Retikulum, den Golgi-Apparat, das trans-Golgi-Netzwerk, Endosomen und Lysosomen, was seinen Transport- und Peptidladeweg widerspiegelt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Bildung von Disulfidbrücken und N-verknüpfte Glykosylierung, die für seine strukturelle Stabilität und Funktion entscheidend sind.
• Als MHC-Klasse-II-Molekül ist HLA-DPB1 grundlegend für die Immunüberwachung, Transplantationsbiologie und Assoziationen mit Autoimmunerkrankungen; es wird auch in gastrointestinalen Epithelzellen exprimiert, die als nicht professionelle APCs fungieren.
• Das Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ca. 29 kDa (reife Form nach Spaltung des Signalsequenz-Peptids).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Resten 40-100 von menschlichem HLA-DPB1 entspricht; diese Region wird vorhergesagt innerhalb der extrazellulären Domäne zu liegen, was darauf hindeutet, dass der Antikörper oberflächenexprimiertes MHC II erkennen kann.
• Beim Western Blot unter reduzierenden Bedingungen ist ein Band nahe 29 kDa zu erwarten; aufgrund von Glykosylierung und möglicher Dimerisierung können jedoch zusätzliche Bänder beobachtet werden; erwägen Sie die Verwendung geeigneter Blockierung und eine gründliche Validierung.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) optimieren Sie Methoden der Antigen-Retrieval (z. B. wärmeinduzierte Epitop-Retrieval) und die Antikörperverdünnung; die Gewebefixierung kann die Epitop-Zugänglichkeit beeinträchtigen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus und Ratte, was auf konservierte Epitope hindeutet; dies kann für orthologe Studien in Nagetiermodellen genutzt werden, die Kreuzreaktivität sollte jedoch experimentell verifiziert werden.
• Für ELISA paaren Sie diesen polyklonalen Antikörper mit einem geeigneten Fang-Antikörper oder Antigen-Ziel; testen Sie verschiedene Beschichtungspuffer und Antikörperkonzentrationen, um optimale Bedingungen zu etablieren.

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