Anti-HLA-Klasse-1-ABC-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P04439 / P01889 / P10321

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von HLA-Klasse-1-ABC

• Die HLA-Klasse-I-Alphakette (HLA-A, -B, -C) bildet die schwere Kette des klassischen Haupthistokompatibilitätskomplex-Klasse-I(MHCI)-Moleküls. Sie assoziiert nicht-kovalent mit Beta-2-Mikroglobulin (B2M), um intrazellulär prozessierte Peptide auf der Zelloberfläche für die Immunüberwachung zu präsentieren.
• Im Komplex mit B2M präsentieren HLA-Klasse-I-Moleküle hauptsächlich virale und tumorstammige Peptide (8-13 Reste) an alpha-beta T-Zell-Rezeptoren (TCR) auf CD8+ T-Zellen und steuern so antigenspezifische zytotoxische T-Zell-Antworten zur Eliminierung infizierter oder transformierter Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:10449296, PMID:12138174, PMID:12393434
• Darüber hinaus präsentieren HLA-Klasse-I-Moleküle Selbstpeptide, die von Signalsequenzen sekretierter oder Membranproteine stammen, und tragen so zur T-Zell-Toleranz und zur Verhinderung von Autoimmunität bei. Verwandte Referenzen: PMID:25880248, PMID:7506728, PMID:7679507
• Die hochpolymorphen HLA-Allele bestimmen Peptid-Bindungsmotive; zum Beispiel präsentiert HLA-A*02:01 (das häufigste Allel in menschlichen Populationen) immunodominante virale Epitope wie das IAV-Matrixprotein (GILGFVFTL) und HIV-1 gag-pol (ILKEPVHGV), charakterisiert durch hydrophobe Anker an Position 2 und dem C-Terminus.
• HLA-Klasse-I-Moleküle sind integrale Membranglykoproteine, die an der Zellmembran und der endoplasmatischen Retikulummembran lokalisiert sind, wo Peptidbeladung und Qualitätskontrolle stattfinden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung; diese regulieren Stabilität, Transport und Immunerkennung.
• Ubiquitär exprimiert in fast allen kernhaltigen Zellen, sind HLA-Klasse-I-Moleküle grundlegend für die Homöostase des Immunsystems und die Unterscheidung zwischen Selbst und Fremd.
• Die Antikörper in diesem Produkt zielen auf eine konservierte N-terminale Region (aa 1-100) ab, die HLA-A, HLA-B und HLA-C gemeinsam ist, und ermöglichen so eine breite Erkennung klassischer MHC-Klasse-I-Moleküle.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Immunogen-Design: Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid, das die Aminosäuren 1-100 von humanem HLA-A, -B und -C abdeckt (basierend auf NP_001229687.1). Diese N-terminale Region umfasst die extrazelluläre Peptidbindungsdomäne und gewährleistet Reaktivität mit allen drei klassischen MHC-Klasse-I-Molekülen. Für eine spezifische Alleldiskriminierung sollten allelspezifische Antikörper in Betracht gezogen werden.
• Western Blotting (WB): Unter reduzierenden Bedingungen ist eine Bande bei etwa 40 kDa zu erwarten. Validieren Sie in geeigneten humanen Zellysaten (z.B. Lymphozyten, Tumorzelllinien) mit bekannten HLA-Expressionsprofilen.
• Immunhistochemie (IHC-P): Aufgrund der transmembranen Natur des Targets kann die Antigen-Demaskierung mittels hitzeinduzierter Epitop-Freilegung (HIER) in Citratpuffer (pH 6,0) die Detektion verbessern. Optimieren Sie die Antikörperverdünnung mit positiven (z.B. Tonsille, Milz) und negativen Kontrollgeweben.
• ELISA: Geeignet für direkten oder Sandwich-ELISA; kombinieren Sie mit Detektionsantikörpern, die Beta-2-Mikroglobulin oder spezifische HLA-Allele erkennen. Validieren Sie mit rekombinanten HLA-Proteinen oder natürlichen MHC-Klasse-I-Komplexen.

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