Anti-Histone H3.3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q16695 / P68431

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3.3

• Histon H3.3 ist eine replikationsunabhängige Variante, die das kanonische H3 in Nukleosomen ersetzt und eine kritische Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur und Chromosomenstabilität spielt.
• Als Kernkomponente des Nukleosoms wickelt und verdichtet H3.3 DNA zu Chromatin, begrenzt die Zugänglichkeit der DNA und reguliert dadurch Prozesse wie DNA-Replikation und Transkription.
• Die H3.3-Variante wird von zwei Genen kodiert, H3F3A und H3F3B, und weist eine hohe Sequenzidentität mit anderen H3-Familienmitgliedern auf, einschließlich des testisspezifischen H3.1t (H3/g, H3.4).
• H3.3 wird unabhängig von der DNA-Replikation in das Chromatin eingebaut und ist an aktiven Promotoren, regulatorischen Elementen und perizentromerem Heterochromatin angereichert.
• Posttranslationale Transkriptionsmodifikationen von H3.3, wie Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung (der „Histone-Code“), sind entscheidend für die Modulation der Chromatinstruktur und -funktion.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist vorwiegend nukleär und chromosomal, was ihrer Rolle in der Chromatinarchitektur entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt den N-terminalen Schwanz und einen Teil der globulären Domäne (aa 1-136) von H3F3A ab, der zahlreiche konservierte Modifikationsstellen enthält. Für Anwendungen, die auf spezifische Modifikationen abzielen, validieren Sie die Erkennung des Antikörpers für modifizierte gegenüber unmodifizierten Formen.
• Für Western Blots sollten Sie die Verwendung von kernangereicherten Lysaten in Betracht ziehen und die Blockierungsbedingungen optimieren, um unspezifische Banden zu reduzieren, da Histone hochbasische Proteine sind.
• Es wird erwartet, dass der Antikörper weitgehend mit Mensch, Maus und Ratte kreuzreagiert, aber die Leistung sollte in jedem experimentellen System validiert werden, da potenzielle Sequenzvariationen in anderen Arten bestehen.

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