Anti-Histon H3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA, ChIP - Q16695 / P68431

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H3 Funktion und Lokalisierung

• Histon H3.1t (auch bekannt als H3.4, H3/g) ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin verpackt und kompaktiert und so die Zugänglichkeit der DNA für zelluläre Maschinerien, die DNA als Vorlage benötigen, einschränkt. Dies spielt eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität.
• Nukleosomen bestehen aus zwei Kopien jedes Kernhistons (H2A, H2B, H3, H4). Histon H3 ist integraler Bestandteil der Histon-Code-Hypothese, bei der seine vielfältigen posttranslationalen Modifikationen (Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung usw.) die Chromatinstruktur und Genexpression steuern.
• Kodiert durch das H3-4 (HIST3H3)-Gen, ist diese testisspezifische Histonvariante ein Mitglied der replikationsabhängigen Histon-H3-Familie, deren Expression hauptsächlich auf Hodenzellen beschränkt ist.
• Das Protein ist streng im Zellkern lokalisiert und mit Chromosomen assoziiert, was seiner Rolle bei der Chromatinorganisation entspricht.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung, ADP-Ribosylierung und Ubiquitinierung, was seine dynamische Regulation während des Zellzyklus und der Entwicklung widerspiegelt.
• Es besitzt DNA-Bindungsaktivität und trägt zur Bildung von Chromatinstrukturen höherer Ordnung und epigenetischen Vererbungsmechanismen bei.
• Mit einem berechneten Molekulargewicht von etwa 15,5 kDa (UniProt) und beobachtet bei 15 kDa, wandert es in der SDS-PAGE als typisches Kernhiston.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen ein Peptid entwickelt, das die Aminosäuren 50-136 von humanem HIST3H3 umspannt, eine Region, die im Nukleosomenkontext wahrscheinlich exponiert ist; erwägen Sie die Verwendung dieses Antikörpers in Anwendungen wie WB, IHC-P, IP, ELISA und ChIP, wie angegeben.
• Angesichts der breit vorhergesagten Kreuzreaktivität validieren Sie den Antikörper in Ihrer spezifischen Spezies und Ihrem spezifischen Gewebe von Interesse, insbesondere für nicht-humane Proben.
• Histon H3 ist über Spezies hinweg hochkonserviert; berücksichtigen Sie mögliche Kreuzreaktionen mit anderen H3-Varianten, wenn eine genaue Variantendiskriminierung erforderlich ist.
• Optimieren Sie die Antikörperkonzentration durch Titration für jede Anwendung, da die Leistung zwischen den Assays variieren kann. Stellen Sie für ChIP sicher, dass geeignete Vernetzungs- und Scherbedingungen verwendet werden.
• Für Western Blotting können Gesamthistonextrakte oder säureextrahiertes Histon aufgrund des basischen Charakters des Proteins klarere Signale liefern.

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