Anti-Histon H1t Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P22492

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H1t

• Histon H1t, auch bekannt als testikuläres H1-Histon, ist ein testisspezifisches Linker-Histon, das an Nukleosomen bindet und die höhergeordnete Chromatinverdichtung erleichtert (wahrscheinlich).
• Im Gegensatz zu anderen H1-Subtypen bildet H1t weniger kompaktes Chromatin, von dem angenommen wird, dass es die homologe Rekombination während der Meiose fördert (PubMed:26757249). Verwandte Referenzen: PMID:26757249
• Kodiert durch das H1-6-Gen (ehemals HIST1H1T), wird H1t zu den replikationsunabhängigen Histon-H1-Varianten gezählt, die gewebespezifische Expressionsmuster aufweisen.
• Subzellulär lokalisiert sich H1t im Zellkern und ist mit Chromosomen assoziiert, was mit seiner Rolle als DNA-bindendes Strukturprotein übereinstimmt.
• H1t durchläuft mehrere posttranslationale Modifikationen einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Citrullinierung, die seine Chromatinbindungsdynamik regulieren können (Schlüsselwörter).
• Als entwicklungs- und differenzierungsspezifischer Marker ist die Expression von H1t eng mit der Spermatogenese verbunden und dient als Indikator für meiotische und postmeiotische Stadien im Hoden.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 150-207 von humanem Histon H1t (C-terminaler Bereich) umfasst. Dieses Design ermöglicht die Detektion von Volllängen-H1t und kann möglicherweise C-terminal-spezifische Modifikationen oder Isoformen nachweisen. Für eine eindeutige Isoformidentifizierung empfehlen wir die Kombination mit einem N-terminal-spezifischen Antikörper.
• Für Western Blot Anwendungen wird die Verwendung von Kernextrakten aus Hodengewebe oder Zelllinien, die bekanntermaßen H1t exprimieren (z. B. Spermatozyten), zusammen mit geeigneten Ladekontrollen und Molekulargewichtsmarkern empfohlen, um die ~22 kDa-Bande zu bestätigen.
• In der Immunhistochemie an Paraffin (IHC-P) sind Hodenschnitte aufgrund der gewebespezifischen Expression ideale Positivkontrollen. Antigen-Retrieval-Bedingungen können die Färbung beeinflussen; optimieren Sie mit Standard-Citrat- oder EDTA-Puffern und validieren Sie mit bekannten positiven/negativen Geweben.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte kann dieser Antikörper in Nagetiermodellen verwendet werden; dennoch ist eine Sequenzalignment der Immunogenregion über die Spezies hinweg ratsam, um die Erkennungsmuster vorauszusehen.
• Die ELISA-Leistung sollte durch Beschichtung mit dem immunisierenden Peptid oder rekombinantem H1t-Protein und Vergleich der Signal-Rausch-Verhältnisse mit geeigneten Blankokontrollen überprüft werden.

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