Anti-Histone H1.2 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P16403

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H1.2

• Kern-Chromatinkondensation: Histon H1.2 bindet an die Linker-DNA zwischen Nukleosomen, um die Chromatinfaser zu bilden, und ist für die Kondensation von Nukleosomenketten zu höher strukturierten Fasern erforderlich. Sein Fehlen führt zu einer globalen Chromatin-Dekondensation (PubMed:26581166, 38530350). Verwandte Referenzen: PMID:26581166 PMID:38530350
• Histon-Reader-Funktion: Erkennt und bindet spezifisch an Histon H3, trimethyliert an Lysin 27 (H3K27me3) (PubMed:26581166). Verwandte Referenzen: PMID:26581166
• PRC2-vermittelte H3K27me3-Deposition: Fördert die Bildung des H3K27me3-Marks durch den PRC2/EED-EZH2-Komplex und erleichtert wahrscheinlich die Wiederherstellung von H3K27me3 nach der Replikation (PubMed:37429872, 40516528). Verwandte Referenzen: PMID:37429872 PMID:40516528
• Regulierung des Spleißens: Wirkt als Regulator des Spleißens, insbesondere bei Exon-Skipping- und Intron-Retention-Ereignissen, durch Bindung an Exons mit hoher Affinität und Beeinflussung der Elongation der RNA-Polymerase II (PubMed:37922872). Verwandte Referenzen: PMID:37922872
• Transkriptionsregulierung: Reguliert die individuelle Gentranskription durch Chromatin-Remodeling, Nukleosomenabstand und DNA-Methylierung (PubMed:38530350). Verwandte Referenzen: PMID:38530350
• Subzelluläre Lokalisierung: Im Zellkern gefunden, spezifisch im Nukleolus und auf den Chromosomen.
• Posttranslationale Modifikationen: Acetylierung, ADP-Ribosylierung, Citrullinierung, Hydroxylierung, Methylierung und Phosphorylierung wurden durch direkte Proteinsequenzierung und Proteomik identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1-100 von humanem Histon H1.2 (P16403) entspricht und den N-terminalen Bereich targetiert. Erwägen Sie die Verwendung des Peptidantigens als Positivkontrolle im ELISA.
• Für Western-Blot-Anwendungen denaturieren Sie die Proben unter reduzierenden Bedingungen und optimieren Sie Blockierung und Antikörperverdünnung, um die hochbasische Natur und die kleine Größe (21 kDa) von Histon H1.2 zu berücksichtigen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) fügen Sie einen Permeabilisierungsschritt hinzu, um den Zugang zum Zellkern zu ermöglichen, und führen Sie eine Co-Färbung mit einem Kernmarker (z. B. DAPI) durch, um die Lokalisierung zu bestätigen. Validieren Sie den Antikörper in Zelllinien oder Geweben, von denen bekannt ist, dass sie Histon H1.2 exprimieren.
• Bei der Verwendung von ELISA sollten Sie beachten, dass die Empfindlichkeit von der nativen Konformation des Proteins abhängen kann; rekombinante oder Peptidantigene können für Standardkurven geeignet sein.

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