Polyklonaler Anti-HIST1H3D-Antikörper für WB, ELISA – Q16695 / P68431

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3.1t

• Histon H3.1t (auch als H3/g oder H3.4 bezeichnet) ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms. Es wickelt und verdichtet die DNA zu Chromatin und reguliert dadurch deren Zugänglichkeit für Transkription, Replikation und Reparatur.
• Es spielt eine zentrale Rolle bei der Aufrechterhaltung der chromosomalen Stabilität und unterliegt einer komplexen Reihe posttranslationaler Modifikationen, die zusammen als Histon-Code bezeichnet werden und Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung umfassen.
• Diese replikationsunabhängige Histonvariante wird vom H3-4-Gen (auch als H3FT oder HIST3H3 bezeichnet) kodiert und hauptsächlich in Hodenzellen exprimiert, was auf eine spezialisierte Funktion bei der Spermatogenese hindeutet.
• Auf subzellulärer Ebene ist Histon H3.1t im Zellkern lokalisiert und spezifisch mit den Chromosomen assoziiert, wo es die Kernpartikel der Nukleosomen bildet.
• Zu den wichtigsten posttranslationalen Modifikationen zählen Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung, ADP-Ribosylierung, Hydroxylierung und Ubiquitinierung. Diese regulieren die DNA-Bindung, die Chromatinstruktur und die Genexpression.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von Histon H3.1t etwa 15 kDa. Optimieren Sie die Porengröße der Membran und die Transferbedingungen für Proteine mit niedrigem Molekulargewicht.
• Verwenden Sie für den ELISA das rekombinante Immunogen als Positivkontrolle, um die Bindungsspezifität des Antikörpers zu validieren.
• Da Histonproteine über verschiedene Spezies hinweg hochkonserviert sind, sollte die vorhergesagte breite Kreuzreaktivität (Mensch, Maus, Ratte und andere) in Lysaten oder Zelllinien der jeweiligen Zielspezies überprüft werden.
• Erwägen Sie die Verwendung einer Säureextraktion oder von histonangereicherten Kernfraktionen, um die Nachweisempfindlichkeit im WB zu verbessern, da Histone zwar sehr häufig vorkommen, jedoch spezifische Extraktionsmethoden erfordern können.

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