Anti-HINT1 Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P49773

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HINT1

• Histidin-Triade-Nukleotid-bindendes Protein 1 (HINT1) ist ein Mitglied der HIT-Superfamilie und wird auch als Proteinkinase C-Inhibitor 1 (PKCI-1) und Adenosin-5'-Monophosphoramidase bezeichnet.
• Funktioniert als Hydrolase, die die Hydrolyse von Purinnukleotidphosphoramidaten wie Adenosin-5'-Monophosphoramidat (AMP-NH2) zu AMP und Ammoniak katalysiert. Es hydrolysieren auch verschiedene Aminoacyl-AMP- und Morpholidat-Substrate. Verwandte Referenzen: PMID:15703176, PMID:16835243, PMID:17217311, PMID:17337452, PMID:22329685, PMID:23614568, PMID:30772266
• Wirkt als desumoylierende Isopeptidase und entfernt SUMO1 von Proteinen wie RGS17 und RANGAP1. Verwandte Referenzen: PMID:31088288
• Dient als Gerüstprotein, das die transkriptionelle Aktivierung durch die LEF1/TCF1-CTNNB1- und MITF-CTNNB1-Komplexe moduliert. Verwandte Referenzen: PMID:16014379, PMID:22647378
• Moduliert den p53/TP53-Proteinspiegel und die p53-vermittelte Apoptose. Verwandte Referenzen: PMID:16835243
• Moduliert den proteasomalen Abbau von Zielproteinen durch den SCF (SKP2-CUL1-F-box-Protein) E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Komplex. Verwandte Referenzen: PMID:19112177
• Lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was mit seinen vielfältigen enzymatischen und regulatorischen Funktionen übereinstimmt.
• Ist in allen Geweben ubiquitär exprimiert, was seine grundlegenden zellulären Funktionen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt das volllängige HINT1-Protein (Aminosäuren 1–126) ab, was bedeutet, dass der Antikörper sowohl lineare als auch konformationelle Epitope erkennen kann.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~14 kDa. Verwenden Sie einen passenden Gelmanteil und geeignete Membrantransferbedingungen, um dieses kleine Protein zurückzuhalten.
• Optimieren Sie bei IF/ICC die Fixierung (z. B. 4 % PFA vs. Methanol) und Permeabilisierung, da die Detektion von nukleären und zytoplasmatischen Proteinpools variieren kann.
• Validieren Sie den Antikörper im relevanten Probensystem (Mensch, Maus oder Ratte) mit bekannten positiven und negativen Kontrolllysaten oder Zellen, da die Kreuzreaktivität je nach Anwendung unterschiedlich ausfallen kann.
• Für ELISA erwägen Sie die direkte Beschichtung mit rekombinantem HINT1-Protein oder ein Sandwich-Format; bestätigen Sie die Reaktivität des Antikörpers gegen das Beschichtungsantigen unter Ihren Pufferbedingungen.

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