Anti-HHLA2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P und ELISA - Q9UM44

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: HHLA2-Funktion und -Lokalisierung

• HHLA2 (auch bekannt als B7-H7, B7y, B7-H5) ist ein Mitglied der B7-Familie von immunregulatorischen Liganden, gekennzeichnet durch eine Immunglobulin-Domäne, Disulfidbrücken und Glykosylierungsmotive.
• Es fungiert als kostimulatorisches Molekül auf antigenpräsentierenden Zellen, interagiert mit TMIGD2 auf T-Zellen, um die TCR-vermittelte Aktivierung, Proliferation und Zytokinproduktion über eine AKT-abhängige Signalkaskade zu verstärken.
• HHLA2 ist ein Typ-I-Transmembran-Glykoprotein (Single-pass), das an der Zelloberfläche lokalisiert ist, mit einem Signalpeptid, extrazellulären Ig-ähnlichen Domänen, einer Transmembranhelix und einem zytoplasmatischen Schwanz.
• Es wird in einer Vielzahl von Geweben exprimiert, einschließlich Dickdarm, Niere, Hoden, Lunge und Bauchspeicheldrüse, und auf niedrigerem Niveau im Dünndarm, in der Leber und der Skelettmuskulatur. In Immunzellen wird es stark in B-Zellen, dendritischen Zellen und Makrophagen exprimiert, aber nicht in T-Zellen nachgewiesen.
• Das Protein unterliegt alternatives Spleißen, wodurch mehrere Isoformen entstehen, die sich in ihren funktionellen Eigenschaften unterscheiden können.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken, die für seine strukturelle Stabilität und Liganden-Rezeptor-Wechselwirkungen entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen, das der extrazellulären Domäne (aa 30-200) entspricht, wurde entwickelt, um Antikörper zu erzeugen, die natives HHLA2 erkennen, potenziell geeignet für den Nachweis von oberflächenexprimiertem Protein in IHC-P und Gesamtprotein in WB.
• Für den Western Blott sollten reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, um Disulfid-gebundene Strukturen aufzulösen; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~47 kDa, was aufgrund der Glykosylierung höher erscheinen kann.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität in relevanten menschlichen Zelllinien oder Geweben, die für die Expression von HHLA2 bekannt sind (z. B. Dickdarm, Niere), unter Verwendung von Negativkontrollen (z. B. T-Zellen), um das Fehlen von Kreuzreaktivitäten zu bestätigen.
• In ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; etablieren Sie experimentell optimale Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen.

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