Anti-HGFAC-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q04756

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HGFAC-Funktion und -Lokalisierung

• HGFAC, auch bekannt als Hepatozyten-Wachstumsfaktor-Aktivator-Serinprotease, ist ein sekretiertes Enzym, das inaktives pro-HGF (einkettiges HGF) durch proteolytische Spaltung in aktives HGF (disulfidverbrücktes Heterodimer) umwandelt, was für die Einleitung der HGF/MET-Rezeptorsignalgebung unerlässlich ist.
• Diese Aktivierung löst nachgeschaltete Kaskaden aus, die an der Zellproliferation, -motilität, Morphogenese und Angiogenese beteiligt sind, und spielt eine zentrale Rolle bei der Entwicklung, Geweberegeneration und dem Krebsfortschritt.
• HGFAC wird als Zymogen synthetisiert und enthält mehrere konservierte Domänen: ein N-terminales Signalpeptid, eine EGF-ähnliche Domäne, eine Kringle-Domäne und eine C-terminale Serinprotease-Domäne, die für die Plasminogen-verwandte Wachstumsfaktorfamilie charakteristisch ist.
• Das Protein wird vorwiegend in der Leber exprimiert, was mit seiner kritischen Funktion bei der hepatischen Regeneration und Homöostase übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken, die für die korrekte Faltung, Stabilität und enzymatische Aktivität entscheidend sind.
• Subzellulär ist HGFAC nach der Sekretion im extrazellulären Raum lokalisiert, wo es seine Aktivatorfunktion ausübt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt den C-terminalen Bereich (aa 408-655) ab, der einen Teil der Serinprotease-Domäne enthält; berücksichtigen Sie diesen Epitoport bei der Entwicklung von Assays, die den Nachweis von verarbeiteten oder unverarbeiteten Formen erfordern.
• Für Western Blots wird eine Bande in der Nähe von 71 kDa erwartet (die das全长-Zymogen oder die verarbeitete schwere Kette darstellt); validieren Sie die Bandspezifität mithilfe von Lebergewebe-Lysaten oder rekombinantem HGFAC-Protein als positive Kontrolle.
• In ELISA-Anwendungen eignet sich der Antikörper möglicherweise zum Erfassen oder Nachweis von HGFAC in biologischen Flüssigkeiten wie Serum oder konditioniertem Medium; die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Orthologen sollte in der entsprechenden Probenmatrix unabhängig bestätigt werden.
• Da HGFAC eine sekretierte Protease ist, sollten Proben unter Bedingungen gesammelt und gehandhabt werden, die die Proteinestabilität erhalten und Zersetzung vermeiden – erwägen Sie die Verwendung von Proteaseinhibitor-Cocktails und das Kühlhalten der Proben auf Eis.
• Die Aktivierung der HGF-Signalgebung erfordert oft sowohl HGFAC als auch sein Substrat pro-HGF; funktionelle Studien können von der Koexpression oder der Ergänzung mit rekombinantem pro-HGF profitieren.

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