Anti-HFE polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q30201

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HFE-Funktion und Lokalisierung

• HFE ist ein Zellmembranprotein, das hauptsächlich an der Regulation des Eisentransports beteiligt ist.
• Es bindet an den Transferrinrezeptor (TFR) und moduliert die zelluläre Eisenaufnahme, indem es die Affinität des TFR für eisengebundenes Transferrin verringert.
• Das Protein wird in humanen Geweben weit verbreitet exprimiert, mit der bemerkenswerten Ausnahme des Gehirns.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken, die für seine Struktur und Funktion wichtig sind.
• Mutationen in HFE sind mit der hereditären Hämochromatose, einer Eisenüberladungserkrankung, verbunden.
• Das Gen unterliegt alternativem Spleißen, was zu mehreren Transkriptvarianten führt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 80-306, die einem wesentlichen Teil der extrazellulären Domäne entsprechen. Diese Region weist Homologie mit murinem HFE auf, was die Kreuzreaktivität unterstützt, die Spezifität sollte jedoch in Ihrem Zielprobensystem validiert werden.
• Für den Western Blot ist unter reduzierenden Bedingungen eine Bande nahe 40 kDa zu erwarten. Glykosylierung kann ein leicht höheres scheinbares Molekulargewicht verursachen; ziehen Sie bei Bedarf einer präzisen Größenbestimmung den Einsatz von Deglykosylierungsenzymen in Betracht.
• Für ELISA kann dieser polyklonale Antikörper als Einfang- oder Nachweisreagenz verwendet werden. Optimale Beschichtungskonzentrationen und Paarungsbedingungen sollten empirisch bestimmt werden.
• Fügen Sie positive Kontrollen wie HFE-überexprimierende Zelllysate und negative Kontrollen wie Hirngewebelysate oder Knockout-Proben hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.

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