Anti-HER2/ErbB2 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P04626

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HER2/ErbB2

• HER2/ErbB2 (Rezeptor-Tyrosinprotein-Kinase erbB-2, auch bekannt als Neu, CD340, p185erbB2) ist ein Mitglied der Epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptorfamilie (EGFR/ERBB), kodiert durch das Protoonkogen ERBB2. Es fungiert als onkogener Treiber bei verschiedenen Krebsarten.
• Das Protein wirkt als essenzieller Korezeptor in Neuregulin-Rezeptorkomplexen, es fehlt die direkte Ligandenbindungskapazität, aber es vermittelt die Signaltransduktion nach Heterodimerisierung mit anderen ERBB-Mitgliedern. Die Aktivierung löst nachgeschaltete Signalwege aus, einschließlich der MEMO1-RHOA-DIAPH1-Signalkaskade, die GSK3B hemmt, was zur Mikrotubuli-Einfangung und -Stabilisierung an der Zellperipherie führt.
• Im Kern dient HER2/ErbB2 als Transkriptionsregulator. Es bindet an den PTGS2/COX-2-Promoter an der Sequenz 5'-TCAAATTC-3', um die Transkription zu aktivieren, und ist an der transkriptionellen Aktivierung von CDKN1A über STAT3 und SRC beteiligt. Zusätzlich verstärkt es die rRNA-Transkription durch die RNA-Polymerase I und fördert so die Proteinsynthese und das Zellwachstum.
• Subzellulär lokalisiert sich HER2/ErbB2 hauptsächlich auf der Zellmembran, einschließlich Membranruffeln, und wird über frühe Endosomen transportiert. Es ist auch im Zytoplasma, der perinukleären Region und im Kern zu finden, was seine dynamischen Signal- und Regulationsfunktionen widerspiegelt.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung und Disulfidbindungsbildung, was seiner Natur als Rezeptor-Tyrosinkinase entspricht. Das Protein verfügt über ATP-Bindungs- und Kinasedomänen, die für die enzymatische Aktivität kritisch sind.
• HER2/ErbB2 wird in einer breiten Palette von Tumorgeweben überexprimiert, insbesondere in Brust-, Dünndarm-, Speiseröhren-, Nieren- und Mundtumoren. Seine gewebespezifische Überexpression macht es zu einem wichtigen klinischen Biomarker und therapeutischen Ziel.
• Der UniProt-Eintrag annotiert HER2/ErbB2 mit Merkmalen wie alternative Initiation, alternatives Spleißen, chromosomale Umlagerung und Krankheitsvarianten, was seine Bedeutung für die Krebsbiologie unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Der polyclonale Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid erzeugt, das die Aminosäuren 1156–1255 umfasst, was der C-terminalen intrazellulären Domäne von menschlichem HER2/ErbB2 entspricht. Diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte konserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für das Western Blotting ist eine Bande nahe 138 kDa zu erwarten. Verwenden Sie positive Kontrolllysate aus HER2-überexprimierenden Zelllinien (z. B. SK-BR-3, BT-474) und validieren Sie mit geeigneten Negativkontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) beachten Sie Methoden zur Antigenrettigung und die Validierung anhand bekannter HER2-positiver Brustkarzinom-Schnitte. Das Signal kann membranös, zytoplasmatisch oder beides sein, abhängig von der Fixierung und den Tumoreigenschaften.
• Für den ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz gegen rekombinantes HER2/ErbB2-Protein oder Peptid verwendet werden; die Paarung mit einem gut charakterisierten monoklonalen Antikörper kann die Assay-Leistung verbessern.
• Die Optimierung von Verdünnungsfaktoren und Inkubationsbedingungen wird für alle Anwendungen empfohlen.

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