Anti-HER2/ErbB2 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC, IF - P04626

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von HER2/ErbB2

• Rezeptor-Tyrosinproteinkinase erbB-2 (auch bekannt als HER2, Neu, CD340) gehört zur Familie der epidermalen Wachstumsfaktorrezeptoren (EGFR) und fungiert als Onkogen bei verschiedenen Krebserkrankungen. Er besitzt keinen bekannten direkten Liganden, wirkt aber als Korezeptor und bildet nach Bindung von Neuregulin aktive Signalkomplexe mit anderen EGFR-Familienmitgliedern.
• HER2/ErbB2 spielt eine entscheidende Rolle bei der Regulation von Zellwachstum, Differenzierung und Überleben durch nachgeschaltete Signalwege, darunter die PI3K/AKT- und RAS/RAF/MEK/ERK-Kaskaden. Er vermittelt außerdem die Mikrotubulusstabilisierung über den MEMO1-RHOA-DIAPH1-Signalweg, was Zellpolarität und Migration beeinflusst.
• Das Protein befindet sich überwiegend auf der Zellmembran, kann aber nach Aktivierung in den Zellkern translozieren, wo es als Transkriptionsfaktor wirkt. Es bindet an spezifische Promotorsequenzen (z. B. TCAAATTC) und reguliert Gene wie PTGS2/COX-2 und CDKN1A, wodurch die rRNA-Synthese und das Zellwachstum verstärkt werden.
• Die subzelluläre Verteilung umfasst Zellmembran, gewellte Membranen, frühe Endosomen, Zytoplasma, perinukleäre Region und Zellkern, was die dynamische Verteilung und die vielfältigen Funktionen widerspiegelt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Glykosylierung und Disulfidbindungsbildung, die für seine Stabilität, Dimerisierung und Kinaseaktivität essenziell sind.
• Gewebespezifität: Hohe Expression in einer Vielzahl epithelialer Tumorgewebe, einschließlich primärer Brusttumoren, sowie Tumoren des Dünndarms, der Speiseröhre, der Niere und der Mundhöhle, was es zu einem wichtigen Biomarker und therapeutischen Ziel macht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (AS 23-652), wodurch die Detektion von vollem Längen-HER2/ErbB2 ermöglicht wird. Diese Region wird häufig bei vielen diagnostischen Antikörpern targetiert und kann eine günstige Spezifität bieten.
• Für Western Blotting liegt die erwartete Bande bei etwa 138 kDa. Verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und validieren Sie mit einer Positivkontroll-Zelllinie, die bekanntermaßen HER2 überexprimiert, wie SK-BR-3 oder BT-474.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF-P) können Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. Citratpuffer pH 6,0, hitzeinduziert) erforderlich sein. Titrieren Sie den Antikörper, um das Signal-Rausch-Verhältnis für Ihr spezifisches Gewebe und Ihr Fixierungsprotokoll zu optimieren.
• Bei Multiplex-IHC (mIHC) überprüfen Sie die Kompatibilität mit anderen Primärantikörpern und Detektionssystemen. Aufgrund der robusten Expression in bestimmten Tumoren sollte eine Verdünnungsreihe verwendet werden, um Kanalübersprechung zu vermeiden.
• Die Reaktivität dieses Antikörpers wurde für humane Proben validiert; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht bestimmt und muss bei Bedarf experimentell überprüft werden.

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