Anti-HER2/ErbB2 monoklonaler Antikörper für FC - P04626

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HER2/ErbB2 Funktion und Lokalisierung

• HER2 (Rezeptor-Tyrosin-Protein-Kinase erbB-2) ist ein Mitglied der epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR/ErbB)-Familie, kodiert durch das ERBB2-Gen. Es ist auch bekannt als p185erbB2, CD340, HER-2/neu und Proto-Onkogen Neu.
• Fungiert als Protein-Tyrosin-Kinase, die Heterodimere mit anderen ErbB-Familienmitgliedern bildet und als bevorzugter Dimerisierungspartner agiert. Spielt eine entscheidende Rolle in Signaltransduktionswegen, die Zellwachstum, -differenzierung und -überleben regulieren.
• Im Zytoplasma reguliert HER2 die Mikrotubuli-Stabilisierung und -Auswachsung über den MEMO1-RHOA-DIAPH1-Signalweg, der zur Hemmung von GSK3B und der Membranassoziation von APC und CLASP2 führt, was entscheidend für den Mikrotubuli-Einfang ist.
• Im Zellkern fungiert HER2 als transkriptioneller Regulator, bindet direkt an den PTGS2/COX-2-Promotor, um die Transkription zu aktivieren. Es reguliert auch die CDKN1A-Expression über STAT3 und SRC und stimuliert die rRNA-Synthese durch RNA Pol I, was die Proteinsynthese und das Zellwachstum fördert.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist dynamisch: hauptsächlich an der Zellmembran, aber auch in frühen Endosomen, Zytoplasma (perinukleäre Region), Zellkern und Zellfortsätzen wie Rüschen zu finden.
• In verschiedenen Tumorgeweben exprimiert, einschließlich primärer Brusttumore und Krebserkrankungen des Dünndarms, der Speiseröhre, der Niere und des Mundes, was es als kritisches Onkogen und therapeutisches Ziel markiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Glykosylierung und Disulfidbindungsbildung, die für seine Aktivierung und Funktion als transmembraner Rezeptorkinase essentiell sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 23-652) des humanen HER2, was diesen Antikörper für den Nachweis von oberflächenexprimiertem HER2 in lebenden, nicht permeabilisierten Zellen mittels Durchflusszytometrie geeignet macht.
• Für die intrazelluläre Färbung sollten sanfte Permeabilisierungsprotokolle in Betracht gezogen werden, um auf nukleäre oder zytoplasmatische HER2-Pools zuzugreifen und gleichzeitig die Epitopintegrität zu bewahren.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für FC-Assays zu bestimmen, da überschüssiger Antikörper den Hintergrund erhöhen oder Aggregation verursachen kann.
• Fügen Sie immer geeignete Isotypenkontrollen und Einzelfärbekontrollen ein, um eine genaue Kompensation und Gating zu gewährleisten.
• Schützen Sie das Konjugat vor Licht und vermeiden Sie Gefrier-Tau-Zyklen, um die Fluorophorstabilität und die Antikörperleistung aufrechtzuerhalten.

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